质粒作为基因工程中的运载体必须要有2个以上的限制酶的切点吗?有的只有一个以上的限制酶的切点就可了,但有的说至少两个以上的切点才行.
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/25 11:50:17
质粒作为基因工程中的运载体必须要有2个以上的限制酶的切点吗?有的只有一个以上的限制酶的切点就可了,但有的说至少两个以上的切点才行.
质粒作为基因工程中的运载体必须要有2个以上的限制酶的切点吗?
有的只有一个以上的限制酶的切点就可了,但有的说至少两个以上的切点才行.
质粒作为基因工程中的运载体必须要有2个以上的限制酶的切点吗?有的只有一个以上的限制酶的切点就可了,但有的说至少两个以上的切点才行.
做为具有使用性的载体,一般最少有2个以上不同的限制性酶切位点,这样能够保证需要插入片段的效率和插入的片段插入的方向性.如果只有一个酶切位点,那在做连接反应时候载体自连现象会非常严重,同时插入片段有可能以2种相反方向插入载体,这样连接成功后还需要筛选方向正确的连接体,这样筛选过于困难,没有实用性.
作为运载体必须具有四个条件:①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制;②有多个限制酶切点,而且每种酶的切点最好只有一个,如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的DNA插入;③ 含有复制起始位点,能够独立复制;④有一定的标记基因,便于进行筛选。如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因。一般来说,天然运载体往往不能满足上...
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作为运载体必须具有四个条件:①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制;②有多个限制酶切点,而且每种酶的切点最好只有一个,如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的DNA插入;③ 含有复制起始位点,能够独立复制;④有一定的标记基因,便于进行筛选。如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因。一般来说,天然运载体往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行人工改建。现在所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。
上面大哥说的很有道理。
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