运载体的标记基因有什么用?书上说是进行筛选,到底是怎样筛选啊?筛选什么?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/22 17:09:19
运载体的标记基因有什么用?书上说是进行筛选,到底是怎样筛选啊?筛选什么?
运载体的标记基因有什么用?
书上说是进行筛选,到底是怎样筛选啊?筛选什么?
运载体的标记基因有什么用?书上说是进行筛选,到底是怎样筛选啊?筛选什么?
看看下面一个试验设计,理解一下筛选,如果给你单独解释筛选恐怕说不明白.
根据下面实验原理和材料用具,设计实验选择运载体——质粒,探究质粒的抗菌素基因所合成的抗菌素类别.
实验原理:作为运载体的质粒,须有标记基因,这一标记基因是抗菌素抗性基因.故凡有抗菌素抗性的细菌,其质粒才可能用作运载体.
材料用具:青霉素、四环素的10万个单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱.
方法步骤:
第一步:取三个含细菌培养基的培养皿并标1、2、3号,在酒精灯旁,用三支注射器,分别注入1亳升蒸馏水、青霉素、四环素液,并使之分布在整个培养基表面.
第二步:将接种环在酒精灯火焰上方灼烧灭菌,并在酒精灯火焰旁取种,然后对三个培养皿接种.
第三步:将接种后的三个培养皿放入37度的恒温箱中培养24小时.
预期结果分析:
(1)设置1号的目的是对照,出现的现象是细菌能正常生活 .
(2)如果1、2、3号培养皿的细菌都正常生长说明此细菌的质粒上既有抗青霉素基因也有抗四环素基因 ;如果1、2号培养皿的细菌能正常生长,3号培养皿的细菌不能正常生长则说明 此细菌的质粒上有抗青霉素基因但无抗四环素基因;如果1、3号培养皿的细菌能正常生长,2号培养皿的细菌不能正常生长则说明 此细菌的质粒上有抗四环素基因但无抗青霉素基因;
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如果只有1号培养皿的细菌能正常生长,2、3号培养皿的细菌都不能正常生长则说明 此细菌的质粒上既无抗青霉素基因也无抗四环素基因.
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比如说抗性基因的标记基因就可以通过在含有对应的抗生素的平板筛选
当vector被转进去了,那么细菌或细胞就具有了抗性;如果没有转进去,那么由于原来的细菌或细胞基因组上没有这种抗性基因,就不能生长。大概就是这样的原理。但是标记基因还有许多种,如果想要详细地了解就在网上或者书里找一找。...
全部展开
比如说抗性基因的标记基因就可以通过在含有对应的抗生素的平板筛选
当vector被转进去了,那么细菌或细胞就具有了抗性;如果没有转进去,那么由于原来的细菌或细胞基因组上没有这种抗性基因,就不能生长。大概就是这样的原理。但是标记基因还有许多种,如果想要详细地了解就在网上或者书里找一找。
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比如大肠杆菌的某pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因,当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体细胞是否具有《《青霉素抗性》》来判断受体细胞是否获得了目的基因。这记住,是筛选出有青霉素抗性的基因,筛选方法简单的说就是将重组质粒转入受体细胞后,将受体细胞置于适宜的条件下培养,在培养的过程中加入氨苄青霉素,受体细胞能够产生抗氨苄青霉素抗...
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比如大肠杆菌的某pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因,当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体细胞是否具有《《青霉素抗性》》来判断受体细胞是否获得了目的基因。这记住,是筛选出有青霉素抗性的基因,筛选方法简单的说就是将重组质粒转入受体细胞后,将受体细胞置于适宜的条件下培养,在培养的过程中加入氨苄青霉素,受体细胞能够产生抗氨苄青霉素抗体,存活下来的受体细胞就是你需要的目的细胞。
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