DEAE纤维素柱子为什么胶总是不贴壁
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/23 15:07:18
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DEAE-纤维素 DEAE cellulose
DEAE-纤维素 DEAE cellulose 为二乙氨乙基纤维素.是阴离子交换纤维素之一.
DEAE—纤维素的活化:称取IgDEAE32或52,放入5ml量筒中,加蒸馏水浸泡过夜,观察溶胀后DEAE的体积.根据所需层析柱的柱床体积计算所需DEAE的用量,称取所需DEAE用蒸馏水浸泡过夜,其间换几次水,每次除去细小颗粒.抽干,改用0.5ml/LNaOH溶液浸泡1h以上,抽干(可用布氏漏斗),用无离子水漂洗,使pH至8左右(用pH试纸检查).再改用0.5ml/LHCl溶液浸泡1h以上,去酸溶液,用无离子水洗至pH6左右.本实验中在用前应以0.0175mol/L,pH6.7磷酸盐缓冲液,浸泡平衡后使用.
用过的离子交换剂可以反复使用,使其恢复原状的方法俗称“再生”.再生并非每次用酸、碱反复处理,通常只要“转型”处理即可.所谓转型就是使交换剂带上所希望的某种离子,如希望阳离子交换剂带上NH+4则可用NH4OH浸泡,如希望阴离子交换剂带上Cl—则用NaCl溶液处理.本实验中DEAE—纤维素在酸碱处理后,用0.0175mol/L,pH6.7磷酸盐缓冲溶液浸泡即可转型,以HPO4取代DEAE中的OH—.一般由于DEAE—纤维素使用后因带有大量杂蛋白,所以再生时,先用0.5ml/L NaOH浸洗,用无离子洗至pH8左右,再转型,即可再使用.
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250Ml的柱子大概需要多少g的DEAE纤维素填料请回答,多谢了
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