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来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/17 08:20:51
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看你的目的了,如果你是要做表达克隆的话,只有强行从atg开始设计了,看运气吧,如果primer和oligo分数太低难以进行pcr可以考虑降低碱基的数目,或者按照密码子表更改碱基,但注意不要改变氨基酸.
又或者你可以在atg之前插入一些碱基修饰一下你的引物,不过如果你做表达克隆,尤其是融合表达时不能改变你的编码框.
如果做的是TA克隆.那就按照模板上死命扩吧.不过估计你最后还是要表达吧?
你要P哪一段？CDS全长？如果没有UTR序列的话，那么你只能强行靠头靠尾设计引物了。引物设计长一些，提高Tm，这样可以减少非特异性扩增。