基因工程在将载体送入受体细胞时还要对受体细胞表面进行处理吗?具体怎么处理啊
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2025/02/03 13:07:18
基因工程在将载体送入受体细胞时还要对受体细胞表面进行处理吗?具体怎么处理啊
基因工程在将载体送入受体细胞时还要对受体细胞表面进行处理吗?具体怎么处理啊
基因工程在将载体送入受体细胞时还要对受体细胞表面进行处理吗?具体怎么处理啊
首先受体细胞有三种类型,包括植物细胞、动物细胞、微生物.其中在高中选修课本三的基因工程中仅介绍了微生物的处理方法,即将大肠杆菌培养在钙离子的溶液中,使其细胞膜的通透性增加,从而使运载体进入受体细胞.具体处理方法可用百度收索“感受态细胞”.希望对你有所帮助.
如果运载体是质粒，受体细胞是细菌，一般对细菌用一定浓度的氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性。
感受态细胞（competent cell）：理化方法诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。
CaCl2法：
操作：
1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀，同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，离开所在区域，诱导细胞成为感受态细胞
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感受态细胞（competent cell）：理化方法诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。
CaCl2法：
操作：
1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀，同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，离开所在区域，诱导细胞成为感受态细胞
细胞膜通透性发生变化，极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成抗脱氧核糖核酸酶的羟基－磷酸钙复合物。
2.此时，将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激（90s），细胞膜的液晶结构会发生剧烈扰动，并随机出现许多间隙，外源DNA就可能被细胞吸收。进入细胞的外源DNA分子通过复制、表达，实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。
3.将转化后的细胞在选择性培养基上培养，筛选出带有外源DNA分子的阳性克隆。
意义：
将构建好的载体转入感受态细胞进行表达，不仅可以检验重组载体是否构建成功，最主要的是感受态细胞作为重组载体的宿主可以进行后续实验，如蛋白质表达纯化等工作。
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