蛋白质分段盐析原理及实验步骤有哪些?

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/11/25 04:08:20

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蛋白质分段盐析原理及实验步骤有哪些?
蛋白质分段盐析原理及实验步骤有哪些?

蛋白质分段盐析原理及实验步骤有哪些?
对分离目的蛋白的盐析,最好采用分段盐析.\x0d由于不同的蛋白质其溶解度与等电点不同,\x0d沉淀时所需的pH值与离子强度也不相同,\x0d改变盐的浓度与溶液的pH值,\x0d可将混合液中的蛋白质分批盐析分开,\x0d这种分离蛋白质的方法称为分段盐析法(fractional saltingout).如半饱和硫酸铵可沉淀血浆球蛋白,\x0d饱和硫酸铵则可沉淀包括血浆清蛋白在内的全部蛋白质.\x0d1.分段盐析的条件先需要进行小实验探索,如：先进行0%-30%\x0d的硫酸铵沉淀,再进行30%-60%的硫酸铵沉淀,\x0d最后进行60%-80%的硫酸铵沉淀.\x0d2.每一段盐析静置之后都将离心取沉淀,透析并检测活性.\x0d通过实验结果可以看出哪一段盐析出来的目的产物最多,\x0d相对来说杂质就更少.\x0d3.比如实验中的活性物质主要在60%-80%这段出来,\x0d在以后的实验中,就可以首先进行0%-60%的硫酸铵沉淀,\x0d这段沉淀物可以抛弃（去处大多数杂质）；然后进行60%-80%\x0d的硫酸铵沉淀,\x0d这段沉淀出来是物质是所需要的目的物质含量比较高的物质,\x0d将其收集进行下一步纯化工作.

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