请问怎样快速提取细菌的DNA啊?也不用提的太纯,提取的DNA是用来做PCR的···一定要快速简便啊!而且要是有详细步骤的,不要试剂盒提取啊!·····谢谢了······
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/25 02:09:12
请问怎样快速提取细菌的DNA啊?也不用提的太纯,提取的DNA是用来做PCR的···一定要快速简便啊!而且要是有详细步骤的,不要试剂盒提取啊!·····谢谢了······
请问怎样快速提取细菌的DNA啊?
也不用提的太纯,提取的DNA是用来做PCR的···一定要快速简便啊!而且要是有详细步骤的,不要试剂盒提取啊!·····谢谢了······
请问怎样快速提取细菌的DNA啊?也不用提的太纯,提取的DNA是用来做PCR的···一定要快速简便啊!而且要是有详细步骤的,不要试剂盒提取啊!·····谢谢了······
跟楼上那种类似
菌落或者离心下来的菌体,加点无菌水,开水煮十分钟就可以拿来当模板了.
楼上和我说的这种开水煮的方法不是每次都奏效,特别是一些革兰氏阳性菌,细胞壁太厚,高温无法破胞,或者菌体碎片对pcr影响太大,经常会有p不出来的情况.而且这种dna只能现用,不能长时间保持,-20℃条件下大概一周失效.
个人感觉成功概率不高大概10次中能p出7次吧.适合大批量pcr的时候用.
如果直接煮不行,可以先用溶菌酶处理,再开水煮.
如果还不行,那只能抽取了,我有个方法1h可以提取完,dna可以保存几年,你要是不行了,再问我.
可以用超声波细胞破碎仪，具体的数据，还要你自己摸索，我只是提供这个方法。
直接用菌落pcr
不需提取DNA,直接用牙签挑点菌落，或取3到5微升菌液，
在pcr反应体系中先不加dna聚合酶，用沸水煮5到10分钟，加PCR聚合酶，进行反应即可。
也可以将上述所有东西加入PCR反应体系后，在设置pcr反应步骤时，在最前面加一步，10min 95摄氏度。进行PCR反应即可。...
全部展开
直接用菌落pcr
不需提取DNA,直接用牙签挑点菌落，或取3到5微升菌液，
在pcr反应体系中先不加dna聚合酶，用沸水煮5到10分钟，加PCR聚合酶，进行反应即可。
也可以将上述所有东西加入PCR反应体系后，在设置pcr反应步骤时，在最前面加一步，10min 95摄氏度。进行PCR反应即可。
收起
1.样品收集：从培养好的LB培养基中吸取1.5ml 细菌培养液，并放到离心机中5000rpm 离心10min,弃上清；
2.于沉淀物中加入200ul的无菌去离子水，混匀，悬浮沉淀；
3.悬浮液在100℃沸水浴中加热10min，然后在4℃放置5min，再在离心机上12000rpm离心20min；
4.取上清作PCR的模板备用。...
全部展开
1.样品收集：从培养好的LB培养基中吸取1.5ml 细菌培养液，并放到离心机中5000rpm 离心10min,弃上清；
2.于沉淀物中加入200ul的无菌去离子水，混匀，悬浮沉淀；
3.悬浮液在100℃沸水浴中加热10min，然后在4℃放置5min，再在离心机上12000rpm离心20min；
4.取上清作PCR的模板备用。
收起