维生素c含量测定请问用比色法测定维生素C含量的实验步骤是什么？应该是用目测（目视）比色法。
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/23 03:15:40
维生素c含量测定请问用比色法测定维生素C含量的实验步骤是什么？应该是用目测（目视）比色法。
维生素c含量测定
请问用比色法测定维生素C含量的实验步骤是什么？
应该是用目测（目视）比色法。
维生素c含量测定请问用比色法测定维生素C含量的实验步骤是什么？应该是用目测（目视）比色法。
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1．样品的制备
（1）鲜样的制备：称100g鲜样和100g 2%草酸溶液,倒入捣碎机中打成匀浆,取10～40g匀浆（含1～2g抗坏血酸）倒入100mL容量瓶内,用1%草酸溶液稀释至刻度,混匀.
（2）干样制备：称1～4g干样（含1～2g抗坏血酸）放入研钵内,加入1%草酸溶液磨成匀浆,倒入100mL容量瓶内,用1%草酸溶液稀释至刻度,混匀.
（3）将（1）或（2）液过滤,滤液备用.不易过滤的样品可用离心除去沉淀,取上清备用.
2．氧化处理
取25mL上述滤液,加入2g活性炭,振摇1min,过滤,弃去最初数毫升滤液.取10mL经氧化的提取液,加入10mL 2%硫脲溶液,混匀.
3．呈色反应
（1）于3支试管中各加入4mL上述溶液.1支试管作为空白,在其余试管中加入1.0mL 2% 2,4-二硝基苯肼溶液,将所有试管放入37±0.5◦C恒温箱或水浴中,保温3h后取出,除空白管外,将所有试管放入冰水中.空白管取出后使其冷到室温,然后加入1.0mL 2% 2,4-二硝基苯肼溶液,在室温中放置10～15min后放入冰水内.其余步骤同样品.
（2）85%硫酸处理：当试管放入冰水后,向每一试管中慢慢滴加入5mL 85%硫酸,需边加入边摇动试管.将试管从冰水中取出在室温放置30min后测定光密度值.
4．测定 用1cm比色杯,以空白液调零点,于500nm波长处测OD值.
5．标准曲线绘制
（1）加2g活性炭于50mL标准溶液中,摇动1min,过滤.
（2）取10mL滤液放入500mL容量瓶中,加5.0g硫脲,用1%草酸溶液稀释至刻度（抗坏血酸浓度20μg/mL）.
（3）取5、10、20、25、40、50、60mL稀释液,分别放入7个100mL容量瓶中,用1% 硫脲溶液稀释至刻度,使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为1、2、4、5、8、10、12μg/mL.
（4）按样品测定步骤形成脎并比色测定.
（5）以OD值为纵坐标,以抗坏血酸浓度（μg/mL）为横坐标绘制标准曲线.
6.结果计算
抗坏血酸的含量：X=(C×V/m)×F×(100/1000)
式中：X——样品中总抗坏血酸含量(mg/100g)
C——由标准曲线查得或由回归方程算得“样品氧化液”中总抗坏血酸的浓度(mg/mL)
V——试样用1%草酸溶液定容的体积(mL)
F——样品氧化处理过程中的稀释倍数
m——试样质量(g)