PCR技术中为何不用解旋酶和普通的DNA聚合酶,而是高温和耐高温的DNA聚合酶
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/27 13:56:21
PCR技术中为何不用解旋酶和普通的DNA聚合酶,而是高温和耐高温的DNA聚合酶
PCR技术中为何不用解旋酶和普通的DNA聚合酶,而是高温和耐高温的DNA聚合酶
PCR技术中为何不用解旋酶和普通的DNA聚合酶,而是高温和耐高温的DNA聚合酶
DNA一般以双链的形式存在,而且双链的比单链的稳定.
DNA的复制需要双链打开,同样,PCR扩增也需要单链的模板,所以就有了PCR引物这个东西,引物简单来说就是一引路的,告诉聚合酶“呐,就从这里开始”.PCR的基本过程包括变性、退火和延伸.DNA的双链主要是靠氢键联系在一起,高温时,氢键很容易就被断开了,双链变成了单链,提供了PCR的模板.当然解旋酶也可以做到断裂氢键,尚且不考虑温度,我只需考虑 1.酶活,酶活是有限的,如果酶量不足,是否会影响到最终的产量,酶都不便宜.2.PCR需要引物,如果使用解旋酶,是否会把引物从模板上裂解下来?
热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,简单来说,复性不就是两条互补的单链变成双链吗,所以根据这个特性,完全可以在DNA聚合酶的作用下把已经和引物结合在一起的模板链复制出来.所以,pcr必然有有一个温度变化的过程.一般来说DNA在高温中容易变性,这就决定了使用的聚合酶必须是耐高温的.
无法控制复制的进程。就是说,如果用解旋酶,会不停地“解旋——复制”。而且最终得到的只是单链,所以一定要高温(我觉得这样更正确点)
随后PCR技术在生物科研和临床应用中得以广泛应用,成为分子生物学研究的最重要PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液
pcr中DNA
变性是在高温的的步骤下进行,所以要用耐高温的。DNA变性的本质是解开双链,DNA解旋酶也可做到,为何非得高温?高温岂不是为寻找合适的DNA聚合酶带来难度。DNA解旋酶可以解开但无法延伸。当然可以延伸,细胞内并无高温环境,靠的就是解旋酶的作用,否则细胞内如何进行DNA的复制,你哪个学校的?你们老师怎么教的?太2了。 PCR不同于细胞内的DNA复制。PCR进行的环境并...
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pcr中DNA
变性是在高温的的步骤下进行,所以要用耐高温的。
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解旋酶在高温下会变性,而PCR是在高温下进行的
LZ很有想法啊,你提的这个问题是现在新发展的一种pcr技术,搜helicase-dependent amplification (HDA)有相关的介绍