博凌科为血液（液体样本）总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）使用时需要注意什么?提取范围如何
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/25 15:13:50
博凌科为血液（液体样本）总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）使用时需要注意什么?提取范围如何
博凌科为血液（液体样本）总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）使用时需要注意什么?提取范围如何
博凌科为血液（液体样本）总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）使用时需要注意什么?提取范围如何
博凌科为血液（液体样本）总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）
改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA 酶,然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱.
试剂盒特点:
◆ 快速--- 15-20分钟完成实验
◆ 高纯--- 独特的去蛋白液多次漂洗去蛋白,
独创基因组DNA漂洗液去除基因组污染
◆ 重复性好---进口特制吸附膜
◆ 方便--- 不需要分离红细胞和白细胞
不需要进行另外的红细胞裂解步骤.
注意事项:
◆ 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
◆ 所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清.
◆ 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行.裂解液RLS可以常温运输,收到后4℃避光保存.
◆ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子.
提取范围：
血液、血清、血浆、病毒培养液以及任何液体形式的样品中提取RNA.
产量：
每1ml液体样品或1mg组织或1×106培养细胞预期的RNA产量
1.人和动物全血,10～20μg
2.人淋巴细胞（约7×107白细胞）,60～70μg
3.肝和脾,10μg
4.肾,4μg
5.骨骼肌和脑组织,1.5μg
6.胎盘,4μg
7.上皮细胞(1×106 cultured cells),15μg
8.纤维母细胞(1×106 cultured cells),7μg
小 知 识
血液总RNA提取是一个比较难的问题,因为血液本身90%多都是水,RNA含量少,所有提取RNA相对困难,现有市场上的大部分血液总RNA提取试剂盒都需要裂解红细胞,倒掉上清,然后再从白细胞中提取总RNA,最后还要用DNase酶进行基因组DNA的消化,整个操作时间超过一个半小时,即使有RNA提取出来,也都降解了.
百泰克创造性的推出了新一代的血液总RNA提取试剂盒,可以说是目前最简便、效率最高的血液总RNA提取试剂盒,他的特点如下：
◆ 无需分离红细胞,直接对血液进行裂解,既简化步骤,又避免白细胞的损失
◆ 无需用DNase酶进行基因组DNA的消化
◆ 步骤简单,只需要半小时
◆ 提取的总RNA可以直接做RT-PCR等下游实验