DNA中混有RNA和蛋白质,请问怎么去除

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/26 11:15:03
DNA中混有RNA和蛋白质,请问怎么去除DNA中混有RNA和蛋白质,请问怎么去除DNA中混有RNA和蛋白质,请问怎么去除先用酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提,这时候经常在样品中会有酚残留,所以之

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DNA中混有RNA和蛋白质,请问怎么去除

DNA中混有RNA和蛋白质,请问怎么去除
先用酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提,这时候经常在样品中会有酚残留,所以之后再用氯仿:异戊醇(24:1)抽提,将酚抽干净,以免影响后续的实验.在抽提前还要在DNA样品中加入1/10体积的PH5.2的3M醋酸钠,增加盐浓度,以免DNA沉淀出来的量太少,都被抽走了.还有最好在抽提之前要把DNA样品的体积扩大,这样也可以减少抽提过程中DNA样品的损失.
酚要用Tris-饱和酚,如果不要求样品很纯,就只用氯仿:异戊醇(24:1)抽提就可以了

先用RNA酶 再用蛋白酶

1,首先溶解样品
2,加氯仿,15000rpm 4度 15分钟离心
3,上层(水层RNA),中间层(半固体),下层(有机溶剂层DNA,加乙醇可沉淀出来)