求列表比较PCR技术与DNA生物复制的异同!RT,请用高二知识回答,
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/18 12:25:40
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求列表比较PCR技术与DNA生物复制的异同!
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PCR技术 DNA生物复制
环境 体外复制,加热,90摄氏度左右 体内,温和的环境
模板 DNA单链 DNA单链
原料 4种脱氧核糖核苷酸 4种脱氧核糖核苷酸
酶 主要是DNA聚合酶 DNA解旋酶,DNA聚合酶,DNA连接酶等各种酶
引物 需要人工合成的引物 自己合成引物成分
步骤 变性--退火--延伸 解旋-起始-延伸-结束
原则 碱基互补配对原则 碱基互补配对原则
楼上实际上说的挺全面的,你要耐下性子来看哦~我给稍稍总结了一下下.
同是运用了DNA碱基互补配对原则
PCR是体外复制技术,需要人工的提供能量(一般90度左右),而且运用的是TAQ酶,复制位点可自选。而DNA生物复制,在体内进行,由于多种酶的参与,使反应所须能量降低,运用的是细胞自己的复制酶,复制位点为全复制下面是相关资料
PCR原理〕
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA...
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同是运用了DNA碱基互补配对原则
PCR是体外复制技术,需要人工的提供能量(一般90度左右),而且运用的是TAQ酶,复制位点可自选。而DNA生物复制,在体内进行,由于多种酶的参与,使反应所须能量降低,运用的是细胞自己的复制酶,复制位点为全复制下面是相关资料
PCR原理〕
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。
发现耐热DNA聚合酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
DNA的复制是一个边解旋边复制的过程。复制开始时,DNA分子首先利用细胞提供的能量,在解旋酶的作用下,把两条螺旋的双链解开,这个过程叫解旋。然后,以解开的每一段母链为模板,以周围环境中的四种脱氧核苷酸为原料,按照碱基配对互补配对原则,在DNA聚合酶的作用下,各自合成与母链互补的一段子链。随着解旋过程的进行,新合成的子链也不断地延伸,同时,每条子链与其母链盘绕成双螺旋结构,从而各形成一个新的DNA分子。这样,复制结束后,一个DNA分子,通过细胞分裂分配到两个子细胞中去!
注:复制时遵循碱基互补配对原则,复制发生在细胞分裂的间期。
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