1kb dna ladder条带跑不开是什么原因大家好,我用琼脂糖凝胶电泳,加了2ul的marker,maker条带跑的不好,只是在最前面的两三个条带跑出来了,后面的几乎都没有分开,电泳条件是150v,时间跑了20min,琼脂
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/15 01:32:37
1kb dna ladder条带跑不开是什么原因大家好,我用琼脂糖凝胶电泳,加了2ul的marker,maker条带跑的不好,只是在最前面的两三个条带跑出来了,后面的几乎都没有分开,电泳条件是150v,时间跑了20min,琼脂
1kb dna ladder条带跑不开是什么原因
大家好,我用琼脂糖凝胶电泳,加了2ul的marker,maker条带跑的不好,只是在最前面的两三个条带跑出来了,后面的几乎都没有分开,电泳条件是150v,时间跑了20min,琼脂糖浓度1.5%,谢谢,是不是参数有问题啊
我是在跑pcr的产物，所以maker都跑不好很郁闷，这样我决定采用1%的琼脂糖150v多跑一会，另外我用的是TAE的缓冲液，如果还是不行的话就要换缓冲液了，谢谢回答，再去试试看
1kb dna ladder条带跑不开是什么原因大家好,我用琼脂糖凝胶电泳,加了2ul的marker,maker条带跑的不好,只是在最前面的两三个条带跑出来了,后面的几乎都没有分开,电泳条件是150v,时间跑了20min,琼脂
建议你把电泳图片贴上,便于分析.
1.5%浓度太高了.1%试试.电泳槽不同,跑相同时间DNA运动距离也不同.说时间不准确,你说你的dna跑了多少厘米吧.太近了就会分不开.况且150v跑1.5%胶电压太小.电压大了又怕琼脂糖化了,DNA扩散也严重,带会粗.所以建议：
首先去别的实验室让他们按他们的条件给你跑一下,看看效果如何.可以把他们的条件copy过来试试.如果想自己摸索,你可以：
1 把胶浓度调至1%,溴酚蓝跑到一半以上基本就可以分开了.
2 如果还不行,把胶调至0.7%.
3 还是不行就到一块长胶,延长电泳时间
4 如果还不行,那就是你购买的MARKER问题,有可能切割得不好,有可能PCR扩增非特异条带多,有可能提纯不好.建议换一个公司的marker再试试.
TAE应该没问题.如果缓冲液有问题,那么不会出现任何一条成型的条带,都是歪歪扭扭或者模糊的.既然前面有几条带清晰就不是缓冲液的问题.实在不行重新配置一下缓冲液.新缓冲液,新胶,应该没问题.
没分开就说明电泳条件不对，marker都跑不开别说目的条带了。
建议电泳条件做以下调整：
1、电压调高，但要防止电泳温度过高导致电泳条带热运动扩散；
2、时间延长；建议首选采纳
3、琼脂糖浓度降低。
电压高了，胶融化了？我以前碰到过这种情况
时间太短了吧,浓度太高了吧