比较溴化乙锭染色和银染的区别
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/27 22:58:26
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溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA.溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团.它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性.在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子.当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用.这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,从而是观察DNA最常用的方法.
银染又称镀银或银浸法,是专门针对蛋白质的一种染色法,常用于显示神经细胞、神经纤维和网状纤维的一种方法,将切片浸于银盐(如硝酸银)染料中,使银盐沉淀在这些结构的表面而显出黑褐色,其余结构不着色,这样观察切片就很清晰.
DNA银染分型的技术是用于常规的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物谱带的显示系统,银染液中的Ag+可以与DNA 形成稳定的复合物,在甲醛的作用下,Ag+被还原称银颗粒,谱带呈黑褐色.多基因座复合扩增产物电泳分离后,PAG凝胶直接用银染法显带.PCR反应中引物或底物dNTPs不经任何修饰,PCR扩增产物不带任何标记,银染显示各基因座等位基因没有基因座特异性,所以复合扩增体系中多个基因座的基因长度范围必须互不重叠.因受片段长度范围选择的限制,能够同时扩增的基因座个数有限或者仅用于单位点扩增.聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法具有操作简便、快速、灵敏和成本低等优点.
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