apoB做Western Blot转膜的时间我在做apoB100的Western,它的分子量是512kD,我老是做不出来,我想问问做出来的朋友们,你们用百分之几的SDS-PAGE胶跑的电泳,转膜的条件是什么?

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/26 00:10:13
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apoB做Western Blot转膜的时间我在做apoB100的Western,它的分子量是512kD,我老是做不出来,我想问问做出来的朋友们,你们用百分之几的SDS-PAGE胶跑的电泳,转膜的条件是什么?
apoB做Western Blot转膜的时间
我在做apoB100的Western,它的分子量是512kD,我老是做不出来,我想问问做出来的朋友们,你们用百分之几的SDS-PAGE胶跑的电泳,转膜的条件是什么?

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512KD?这个蛋白太大了一点.我最多转过200多KD的,你试试看转过夜呢?
网上找了一篇文献,Plos One 2008
ApoB100-LDL Acts as a Metabolic Signal from Liver to Peripheral Fat Causing Inhibition of Lipolysis in Adipocytes
里面没有特别讲条件,但确实做了western,ApoB100和48都有,估计转膜时间要很长很长,他们的条件如下：
Mouse plasma samples (2 μl) were fractionated by SDS-PAGE using 4% gels.The apoB proteins were detected with rabbit antiserum against mouse apoB (Biosite,Taby,Sweden).The binding of primary antibodies was assessed with horseradish peroxidase–labeled donkey anti-rabbit antibodies and ECL western blotting reagents (Amersham Biosciences,GE Healthcare Biosciences,Little Chalfont,Buckinghamshire,England).

apoB做Western Blot转膜的时间我在做apoB100的Western,它的分子量是512kD,我老是做不出来,我想问问做出来的朋友们,你们用百分之几的SDS-PAGE胶跑的电泳,转膜的条件是什么? western blot的具体步骤? western blot 的目的 在做western blot时,跑胶的电流为什么越来越低?转膜的电流却越来越高呢 做western blot 的时候怎样选择抗体浓度? western blot的内参总是做不好...老是条带不一致 急需脑啡肽的分子量,做western blot用 Western Blot（WB）实验最后显色过程中总是没有条带?最近做Western Blot蛋白印迹实验 ,大家推荐下做Western Blot外包的公司,北京的最好,Western Blot的价格 Western Blot 化学发光(ECL)为什么出现高背景?我做Western Blot,经常出现背景很多的现象, western blot marker的作用? 请问western blot用什么设备做? 做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?用marker标记 western blot转膜时 电流330mA,转膜1小时后 膜上没有marker的条带请问这是为什么呢? 做Akt的Western blot为什么要做P-Akt和总Akt western blot的实验原理(详细的) western blot总是不发光为什么?做了好多遍western blot,总是不发光,可能的 原因有哪些啊? Southern、Northern、Western blot的异同 western blot 中洗膜的作用是什么 Western Blot 实验的原理是什么?