DNA提取失败的原因?目前我在做叶蜂DNA提取的实验,由于本人学艺不精DNA提取失败了,失败的原因有哪些?第一天:采用的是水浴法,先剪下叶蜂的胸部加三百微升CTAB,再捣碎十分钟到二十分钟
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/26 15:48:15
DNA提取失败的原因?目前我在做叶蜂DNA提取的实验,由于本人学艺不精DNA提取失败了,失败的原因有哪些?第一天:采用的是水浴法,先剪下叶蜂的胸部加三百微升CTAB,再捣碎十分钟到二十分钟
DNA提取失败的原因?
目前我在做叶蜂DNA提取的实验,由于本人学艺不精DNA提取失败了,失败的原因有哪些?
第一天:采用的是水浴法,先剪下叶蜂的胸部加三百微升CTAB,再捣碎十分钟到二十分钟,然后水浴 65摄氏度 4小时,在加等体积异戊醇:酚:氯仿摇匀,10000转/min离心机离心15分钟,取上清液,记下取出上清液量加等体积的异戊醇:酚:氯仿摇匀10000转/min离心10分钟,取出上清液,记下取出量加1/10体积的3mol/L NaAc PH值5.2和预冷的2.5倍体积的无水乙醇混匀,-20摄氏度保存过夜
第二天:取出-20摄氏度保存提取液,摇匀,13000转/min离心10min,弃上清液(能看见白色沉淀),再加入70%的C2H5OH漂洗,再离心条件跟上面一样时间改为离心5min,弃上清液,再漂洗一次,保存自然干燥
干燥完成后,加五十微升TE充分溶解,-20摄氏度保存备用。
DNA提取失败的原因?目前我在做叶蜂DNA提取的实验,由于本人学艺不精DNA提取失败了,失败的原因有哪些?第一天:采用的是水浴法,先剪下叶蜂的胸部加三百微升CTAB,再捣碎十分钟到二十分钟
看到白色沉淀的都不是好DNA,全是蛋白渣子.
一个是操作问题,比如捣碎充分了吗?苯酚氯仿作用时间是不是太长了,你摇了多久?你都没有说清楚.
二是试剂问题,确认别人用过并且成功后再用,要么自己配制.
乙醇体积少一点.两倍体积.
另外最后一点:你怎么知道DNA提取失败了?电泳没有条带?还是PCR扩增失败?
就是嘛
啥信息都没有,怎么分析?
原因多的是。
方法,步骤,试剂!