RNA提取问题RNA沉淀回溶后,有淡黄色凝胶样沉淀,怀疑有蛋白质杂质.我将之又加了酚和氯仿异戊醇二次抽提,离心后,淡黄色凝胶样沉淀在上清和有机相之间.吸取上清加异丙醇有许多颗粒沉淀.为

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 16:40:16
RNA提取问题RNA沉淀回溶后,有淡黄色凝胶样沉淀,怀疑有蛋白质杂质.我将之又加了酚和氯仿异戊醇二次抽提,离心后,淡黄色凝胶样沉淀在上清和有机相之间.吸取上清加异丙醇有许多颗粒沉淀.为RNA提取问题R

RNA提取问题RNA沉淀回溶后,有淡黄色凝胶样沉淀,怀疑有蛋白质杂质.我将之又加了酚和氯仿异戊醇二次抽提,离心后,淡黄色凝胶样沉淀在上清和有机相之间.吸取上清加异丙醇有许多颗粒沉淀.为
RNA提取问题
RNA沉淀回溶后,有淡黄色凝胶样沉淀,怀疑有蛋白质杂质.我将之又加了酚和氯仿异戊醇二次抽提,离心后,淡黄色凝胶样沉淀在上清和有机相之间.吸取上清加异丙醇有许多颗粒沉淀.为确保抽提完全,我往有机相(表面有凝胶样沉淀覆盖)里加了GTC,再次抽提,异丙醇还能沉淀许多雪花样颗粒.如此反复多次,离心后上清仍就能沉淀.
想不通为什么.
我的材料是鸡肝。
第一次沉淀中淡黄色凝胶样是什么东西?
纯的RNA加异丙醇后是什么样的沉淀?

RNA提取问题RNA沉淀回溶后,有淡黄色凝胶样沉淀,怀疑有蛋白质杂质.我将之又加了酚和氯仿异戊醇二次抽提,离心后,淡黄色凝胶样沉淀在上清和有机相之间.吸取上清加异丙醇有许多颗粒沉淀.为
纯的RNA加异丙醇后:溶液开始稍稍变白浊,只有离心后才能看到沉淀.
我倒觉得,你别管黄色东西是什么,就那个时候离心,然后去上清作为rna去跑胶,看看如果效果很好就可以了.显然黄色物是不容于水的,离心很容易去掉.但是如果跑胶效果不理想可能需要考虑换方法了.

首先你的材料是什么?
有机相里的RNA就不要再去抽提了,提出来的也降解很厉害。
你沉淀出的雪花样颗粒已经不是RNA了。