PCR试剂盒问题各位大虾好,我是一名菜鸟,最近遇到一个问题,我需要扩增一个长度为2500左右的DNA片段,该片段连在质粒上,我想订Takara公司的PCR试剂盒,但是不知道应该订哪一种,有哪位高士能指
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/19 06:13:50
PCR试剂盒问题各位大虾好,我是一名菜鸟,最近遇到一个问题,我需要扩增一个长度为2500左右的DNA片段,该片段连在质粒上,我想订Takara公司的PCR试剂盒,但是不知道应该订哪一种,有哪位高士能指
PCR试剂盒问题
各位大虾好,我是一名菜鸟,最近遇到一个问题,我需要扩增一个长度为2500左右的DNA片段,该片段连在质粒上,我想订Takara公司的PCR试剂盒,但是不知道应该订哪一种,有哪位高士能指导我一下不?http://www.takara.com.cn/?action=Page&Plat=pdetail&newsid=795&subclass=1这个是该公司主页上有关PCR产品的信息,希望能给我一些指导和帮助.
PCR试剂盒问题各位大虾好,我是一名菜鸟,最近遇到一个问题,我需要扩增一个长度为2500左右的DNA片段,该片段连在质粒上,我想订Takara公司的PCR试剂盒,但是不知道应该订哪一种,有哪位高士能指
不知道你引物设计好了没?如果引物已经有的话,试剂盒就容易解决.
不过还要看你得实验目的：
1.如果只是简单的把2500BP的片段扩增出来,普通的PCR polymerase就可以了,takara的60多元一支.
2.但是普通的酶2500BP的有可能扩增不出来,这时候你就可以选LA酶.大概是270元
3.若实验要求更高,就用高保真酶,也就是最贵的,300多吧.这个一般用在克隆、测序等方面.
网站上的premix是指所有的原料都混好了,包括DNTP,MG2+,POLYMERASE,在实验过程中只要加水,模板和引物就可以了,很方便.
premix taq version2.0或premix taq version2.0（dye）(PCR完后直接电泳,不上加溴酚蓝)可以满足把2500BP扩增出来,如果老板有钱,可以用EX taq version系列的,LA和hot star的酶都很好.
如果没有特殊情况（如复杂结构、高GC等）Premix Taq Version 2.0，Premix Taq Version 2.0 (Loading dye Mix)，就比较适合你，这是普通的Taq试剂盒，末端加A，价格实惠。Premix Taq Version 2.0 (Loading dye Mix)加了染料，p完直接电泳更方便。你质粒模板，2.5kb，应该好p。
SapphireAm...
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如果没有特殊情况（如复杂结构、高GC等）Premix Taq Version 2.0，Premix Taq Version 2.0 (Loading dye Mix)，就比较适合你，这是普通的Taq试剂盒，末端加A，价格实惠。Premix Taq Version 2.0 (Loading dye Mix)加了染料，p完直接电泳更方便。你质粒模板，2.5kb，应该好p。
SapphireAmp Fast PCR Master Mix，也行，速度快，但价格比上面两个贵多了，你只有2.5kb，如果不是非常赶实验，就不必这个。
如果你对保真性要求高（比如要做表达），最好还是Premix Ex Taq Version 2.0和Premix Ex Taq Version 2.0 (Loading dye Mix)，这两个贵点，但用的是ex taq，保真性会比普通taq好很多。
我曾被普通Taq的保真性（虽然不是takara的）害惨过，所以现在只要是做克隆，坚决用高保真酶。
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1 引物是短的单链DNA，所以可以和单链的DNA或者RNA配对。 2 一般引物设计的时候会避免这种情况，比如加长引物，这样引物和3‘端的结合能力比和模板中间的
广州健仑生物科技有限公司是TAKARA产品的中国总代理，