一块布上有一片血迹,请设计一个实验,说明它是人血还是其他动物的血迹
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/20 15:47:12
一块布上有一片血迹,请设计一个实验,说明它是人血还是其他动物的血迹
一块布上有一片血迹,请设计一个实验,说明它是人血还是其他动物的血迹
一块布上有一片血迹,请设计一个实验,说明它是人血还是其他动物的血迹
一、实验原理
血迹检验,是最常见的法医物证检验之一.它通常可以解决是不是血迹,是人血还是动物血,属何种血型,是男人血还是女人血,以及出血部位、出血时间和出血量等问题. 为了保证检验得以顺利进行,血迹检验通常采取肉眼检查、须备试验、确证试验、种属试验、血型测定、性别检验和出血部位检验等的顺序.
1.预备试验 该试验为初步的、试探性的血迹检验,目的是为了解决有无血迹存在的可能性.预备试验方法简便,灵敏度高,但特异性差.阳性结果,只能证明检材上有血迹存在的可能性,而不能肯定就是血迹.当然该试验的阴性结果,可以排除有血迹存在的可能,也就不必再进行下一步的检验了.血迹预备试验的方法很多,常见的有联苯胺试验、酚酞试验、氨基比林试验、鲁米诺发光试验、紫外线检查等.如酚酞试验,利用血红蛋白或正铁血红素的过氧化酶活性,使过氧化氢分解出新生态氧,将还原酚酞氧化成酚酞,酚酞在碱性溶液中呈粉红色.本法的灵敏度极高,可达10—50万倍,但非特异性,氧化剂(如铜、铁、镍)及脓液、精液、尿液、新鲜植物汁等均呈阳性反应.
2.确证试验 经过预备试验,如果检材呈阳性反应,说明有血迹存在的可能性,需进一步进行确证试验,以明确是不是血迹.与预备试验相反,确证试验特异性强,但灵敏度较低,如果检材条件差,如经日晒雨淋、混有杂质或已腐败的血迹,则难以出现阳性反应.因而确证试验的阳性结果可以肯定为血迹,阴性结果却不能完全排除血迹存在的可能性. 确证试验的方法也很多,如血色原结晶试验、氯化血红紫结晶试验和光谱检查等.如氯化血红紫结晶试验,原理:血红蛋白受酸性作用,生成正铁血红素,由氯的作用使正铁血红素成为氯化血红素结晶.
3.种属试验 经过预备试验和确证试验确定为血迹后,还需要鉴别其种属,确定是人血还是动物血.血迹种属试验的方法也很多,如沉淀反应、琼脂扩散试验、对流电泳试验、抗人球蛋白消耗试验、纤维蛋白板试验、胶乳颗粒凝集试验和红细胞凝集试验等.如抗人球蛋白消耗试验,原理:检材浸液中的人血清球蛋白与抗人球蛋白血清相遇时,抗人球蛋白被吸附 (消耗),再用经球蛋白致敏的红细胞作指示剂,观察消耗后的抗人球蛋白血清对该红细胞的凝集力,如显著下降或消失,即证明检材中含人血清球蛋白.
当某个动物被注射其它物种动物的抗原(如蛋白质)时,在它的血清内就会出现一种叫沉淀素的抗体,将人的血清或全血注射进兔的体内时,在其血清内的抗体就会和人血清、其它体液和组织抽提物的蛋白质反应.反应是特异性的,如果是阳性结果,就证明血液中蛋白质或其它蛋白质来源于人类.抗人血清不会和其它种属动物的蛋白质反应.
二、实验仪器设备
1.载玻片 2.离心或Seitz过滤器 3.水浴锅
三、实验试剂、实验动物
1.0.9%的盐溶液 2.石蕊试剂 3.0.1%的氢氧化钠溶液或盐酸 4.生理盐水 5.酚酞试剂 6.食盐7冰醋酸 8.兔子(抗人球蛋白血清制备 )9.经球蛋白致敏的红细胞
四、实验步骤
抗人球蛋白血清制备:兔可以提供最合适的抗体,抗血清就是从这些抗体中制备的.每隔5天就给3只或4只兔子静脉内注射2ml未稀释的血清2次或3次.在最后一次静脉内注射后6天通过腹腔内注射4或5ml的全血.给兔子连续6或7天静脉内注射用生理盐水稀释的1:10的血清2ml,停止一个星期然后接着皮下注射同等量的稀释血清.有些动物经过两次注射产生了有效的免疫血清,但还有一些需要第三次或第四次注射.如果考虑时间的话,连续每天剂量为5ml、10ml和15ml的未稀释的血清或全血可能会被注射入腹腔内,在最后一次注射9天后给兔子取血并分离血清.在所有这些方法中,都是在最后一次注射后7-10天给兔子取血.
斑痕是干燥的,只有将少量的检材溶解在少量的0.9%的盐溶液中才能制备符合条件的稀释液.制备的混合物应该是透明、无色和并且是中性的,如果不是就要离心或用Seitz过滤器过滤.通常稀释液用石蕊试纸测试是否中性,如果是酸性或碱性,就要分别用0.1%的氢氧化钠溶液或盐酸进行中和.1.酚酞试验 将血痕的生理盐水浸液1—2毫升置试管中煮沸半分钟,破坏可能存在的生物氧化酶;冷后,加5滴还原酚酞液,半分钟后,如不变红色,再加数滴3%过氧化氢,则立即出现程度不同的粉红色至红色为阳性反应.2.氯化血红素结晶试验 检查:置检材于载玻片上,分别加食盐、冰醋酸各少许,加热至刚产生小气泡.如为血痕冷后则析出褐色长方形或菱形结晶.勿抗人球蛋白过热.受过高温的血痕不能出现阳性反应.3.抗人球蛋白消耗试验 检查:将一定量血痕浸液与抗人球蛋白血清混合,置37℃30分钟,取1滴混合液与1滴由不完全Rh抗体致敏的指示红细胞悬液放载玻片上,观察凝集情况.
五、实验预期目标
酚酞试验中,酚酞会变红;氯化血红素结晶试验中,血痕冷后则析出褐色长方形或菱形结晶,最后那个种属鉴定,可能动物血和人血都有.
一、 实验原理
人和各种动物的蛋白质都具有种属特异性,将种属不同的蛋白质分别注射入家兔体内,在家免的血清中就会产生对所注射的蛋白质起特异反应的物质。这种物质再与相应的蛋白质作用,就会发生沉淀反应,出现白色沉淀环。通常我们把血清中这种起特异反应的物质叫着抗体,把注入的蛋白质叫作抗原,能与抗原发生沉淀反应的抗体血清叫免疫血清或沉淀素血清。免疫血清中的抗体只与相应的抗原发生沉淀反应。例如,注入...
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一、 实验原理
人和各种动物的蛋白质都具有种属特异性,将种属不同的蛋白质分别注射入家兔体内,在家免的血清中就会产生对所注射的蛋白质起特异反应的物质。这种物质再与相应的蛋白质作用,就会发生沉淀反应,出现白色沉淀环。通常我们把血清中这种起特异反应的物质叫着抗体,把注入的蛋白质叫作抗原,能与抗原发生沉淀反应的抗体血清叫免疫血清或沉淀素血清。免疫血清中的抗体只与相应的抗原发生沉淀反应。例如,注入人体蛋白质获得的抗人免疫血清,只与人体蛋白质发生沉淀反应,而不与动物蛋白质发生沉淀反应。同样,注入某类动物(如猪、牛、羊等)蛋白质获得的抗该类动物免疫血清,也只与该类动物蛋白质发生沉淀反应,而不与人或其他动物的蛋白质发失沉淀反应。
二、 材料试剂
1. 人血
2. 兔子
3. 血管夹
4. 线
5. 尖头剪刀
6. 放血管
7. 三角烧瓶
8. 防腐剂(0.01%硫柳汞或0.02%叠氮钠 )
三、 实验步骤
1. 人血清的制备:人血管中抽出的血液,直接放入空试管中,不做任何抗凝处理,血液逐渐发生凝固,数小时后血块慢慢缩小并释放出黄色的液体及所需血清
2. 动物血清的制备:a 家兔仰卧同上固定.头部略放低以暴露颈部.剃毛及消毒皮肤; b沿颈部中线切开皮肤约10cm,分离皮下组织,直至暴露出气管两侧的胸锁乳突肌; c 分离胸锁乳突肌与气管间的颈三角区疏松组织,暴露出颈总动脉后使之游离; d.于动脉下套入两根黑丝线,分别置于远心及近心端.结扎远心端的丝线.近心端的动脉用血管夹夹住; e 用尖头小剪刀在两根丝线间的动脉璧上剪一小口,插入塑料放血管.再将近心端的丝线结 扎固定于放血管上,以防放血管滑脱; f 松开血管夹,使血液流入灭菌三角烧瓶中.一般一只家兔可放血80~100ml. g将三角烧瓶的血置37℃温箱1小时,再置4℃冰箱内3~4小时.待血液凝固血块收缩后,用毛细滴管吸取血清.于3000rpm离心15分钟,取上清加入防腐剂(0.01%硫柳汞或0.02%叠氮钠,最终浓度),分装后置4℃冰箱中保存备用.
3. 将检材浸出液与抗人免疫血清重叠。
四、 实验结果
如果呈阳性反应,即在检材浸出液与抗人免疫血清之间的接触面上生成白色沉淀环,便可证明是人血。同样要确定检材是何种动物的血迹,就用各种抗动物免疫血清与检材浸出液相作用,看是否发生沉淀反应,以此来确定是否是动物血。
收起
不同来源的血液抗原性不同,可以检测其抗原性
还可以尝试提取DNA,扩增检测