如何检测MCF-7细胞的mRNA表达?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 23:48:46
如何检测MCF-7细胞的mRNA表达?
如何检测MCF-7细胞的mRNA表达?
如何检测MCF-7细胞的mRNA表达?
觉得还是应该通过提全RNA来检测.
就是提取全RNA,然后根据你要检测的mRNA序列设计引物,PCR扩增,定性、定量检测都可以
抗原--抗体杂交技术!
方法构建重组的表达E2F1 RNAi的逆转录病毒载体,将重组载体转染人MCF-7细胞中。筛选稳定转染的单克隆细胞扩大培养,应用RT-PCR方法检测转染组与对照空载体组及未转染组细胞E2F1 mRNA表达情况。结果转染组挑出7个单克隆细胞组,E2F1 mRNA半定量表达分别为0.983±0.199,0.663±0.137,1.188±0.269,0.914±0.132,1.073±0.257,0.8...
全部展开
方法构建重组的表达E2F1 RNAi的逆转录病毒载体,将重组载体转染人MCF-7细胞中。筛选稳定转染的单克隆细胞扩大培养,应用RT-PCR方法检测转染组与对照空载体组及未转染组细胞E2F1 mRNA表达情况。结果转染组挑出7个单克隆细胞组,E2F1 mRNA半定量表达分别为0.983±0.199,0.663±0.137,1.188±0.269,0.914±0.132,1.073±0.257,0.870±0.139,0.888±0.078,对照空载体组与未转染组E2F1mRNA半定量表达分别为2.177±0.902和2.443±0.496;转染组所有细胞E2F1 mRNA表达与未转染组相比差异有显著性(P0.05),E2F1 mRNA抑制率为100%(7/7);转染组与空载体对照组相比,除1个单克隆细胞组E2F1mRNA表达与对照空载体组差异无显著性(P0.05),其它6组与对照空载体组差异有显著性(P0.05),E2F1 mRNA抑制率为85.5%(6/7);转染组细胞之间及对照空载体组与未转染组之间差异无显著性(P0.05)
收起