C18这种型号的色谱柱要怎么保护才妥当?

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/18 13:36:05
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C18这种型号的色谱柱要怎么保护才妥当?
C18这种型号的色谱柱要怎么保护才妥当?

C18这种型号的色谱柱要怎么保护才妥当?
C18色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏.在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护C18色谱柱.
①避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动.温度的突然变化或者使C18色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述).
②应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然.
③一般说来C18色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质.否则反冲会迅速降低柱效.
④选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏.有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解.
⑤避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱.保护柱一般是填有相似固定相的短柱.保护柱可以而且应该经常更换.
⑥经常用强溶剂冲洗C18色谱柱,清除保留在柱内的杂质.在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml.

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