如何计算引物的Tm值?

引物的TM值如何计算 如何计算引物的Tm值? 如何计算引物的Tm值? 请教如何计算引物的Tm值?最好能给出计算公式等. 引物的Tm值是什么 如何理解Tm= 4(G+C)+2(A+T).比如说一段引物的G+C含量为40%,那么这段引物的Tm值是多少? 引物的退火温度如何计算,用tm值减去5度,靠谱不?用1m na+的还是50mmna+? 引物的长度包括酶切位点在内么?计算Tm值以及计算GC含量时用算酶切位点的么? 请教如何计算出兼并引物的退火温度我是一个新手,如何根据公司送来的兼并引物的单子上的Tm值推出实际PCR时的退火温度呢?引物单子上有两个Tm值,分别是1M 钠离子,50mM钠离子条件下的Tm值.实 PCR中Tm值如何计算? 关于退火温度与引物Tm~我用PP5做的引物发现引物Tm值比退火温度低 这很奇怪啊,做PCR是不是退火温度一定要比Tm高呢? 带酶切位点的引物设计问题带酶切位点的引物设计时计算Tm值,退火温度及GC含量时是否要把酶切位点和保护碱基计算在内?我觉得不用,因为酶切位点可以不用跟模板结合, 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? PCR中 两个引物的Tm值相差太大有什么害处? 如果从primer5中得到引物的tm 值怎么确定pcr温度 我的引物该如何选择?我要设计兼并引物,但是两个最佳位置处的引物Tm值相差较大,而且有二聚体和发卡结构,其余的位置兼并位点较多,不敢用来设计引物,所以现在不知道该怎么办,请师兄师姐 ISSR－PCR退火温度如何设定有些引物说明书上的Tm值只有30～40度,通过公式2（A＋T）＋4（G＋C）－2计算的温度也只有30多度,我该如何设定退火温度? tm值如何估算??