WB加完发光液暗室里可见整张膜都发光,是为什么呀?膜用百分之五的BSA封闭过夜的!

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/26 23:00:34
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如果整张膜都发光,压片后胶片上没有条带,整个一片都是黑乎乎的,应该是曝光过度了,和封闭没有太大关系.
建议改进方法:降低上样量、降低一抗或二抗浓度、降低抗体孵育时间、改用效果不那么强的发光液(如果只有一种发光液,可以将其用水稀释后再用),总之使用一切能减少曝光强度的方法.
整张膜都发光的补救方法:将膜用甲醇浸泡几秒(用镊子夹住膜在甲醇里涮2-3次即可),打断ECL和二抗的链接,TBST多洗几次,再用强度更弱的发光液或稀释过的发光液重新显色.