如何提取细胞膜(植物细胞)上的蛋白质

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/12/22 09:28:36

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如何提取细胞膜(植物细胞)上的蛋白质
如何提取细胞膜(植物细胞)上的蛋白质

如何提取细胞膜(植物细胞)上的蛋白质
一、植物组织蛋白质提取方法
1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入）,准备提取液放在冰上.
2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）.
3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃
4、提取上清夜,样品制备完成.
蛋白质提取液：300ml
1、1Mtris-HCl（PH8） 45ml
2、甘油（Glycerol）75ml
3、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g
这种方法针对SDS-PAGE,垂直板电泳!

二、植物组织蛋白质提取方法
三氯醋酸—丙酮沉淀法
1、在液氮中研磨叶片
2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜,然后离心（4℃8000rpm以上1小时）弃上清.
3、加入等体积的冰浴丙酮（含0.07%的β-巯基乙醇）,摇匀后离心（4℃8000rpm以上1小时）,然后真空干燥沉淀,备用.
4、上样前加入裂解液,室温放置30分钟,使蛋白充分溶于裂解液中,然后离心（15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准）,可临时保存在4℃待用.
5、用Brandford法定量蛋白,然后可分装放入-80℃备用.
药品：
提取液：含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮
裂解液：2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml灭菌的去离子水中（终体积为5ml）,使用前再加入1M的DTT65ul/ml.
这种方法针对双向电泳,杂质少,离子浓度小的特点!当然单向电泳也同样适用,只是电泳的条带会减少!

如何提取细胞膜(植物细胞)上的蛋白质如何提取细胞膜（动物细胞）上的蛋白质求提取并纯化动物细胞膜蛋白而避免膜上的脂类等物质的污染的最佳方法.可以以肝细胞为例. 如何提取鸡血、鸭血、兔血里的细胞膜,不是细胞膜蛋白哈,是提取细胞膜. 细胞膜上蛋白质在细胞中是如何合成和运输的如何提取植物细胞膜蛋白? 如何使植物细胞的细胞膜涨破植物细胞的细胞膜上有胆固醇吗? 请问有谁提取过藻类或者植物细胞膜?能否测小球藻或者植物细胞膜上的钾钠离子浓度如何从细胞中提取蛋白质如何从细胞中提取蛋白质哪些植物器官的细胞中富含糖类、脂质或蛋白质,怎样从植物器官中提取这些化合物植物细胞和动物细胞的细胞膜,细胞质和细胞核在功能上相同吗细胞膜结构中只有细胞膜有蛋白质吗?细胞膜蛋白指的是细胞膜上的蛋白还是细胞里所有膜上的蛋白？如何提取酵母细胞膜? 植物细胞的细胞膜概念,越短越好什么细胞适合提取细胞膜? 提取提取植物细胞的DNA需要加洗涤剂,裂解细胞膜,但它还有细胞壁呢,DNA怎么释放出来呢? 不同功能的细胞,其细胞膜上蛋白质的种类和数量相同.这句话对吗