硫乙醇酸盐肉汤和硫乙醇酸盐培养基的区别?我想取小鼠腹腔巨噬细胞,请问应该给小鼠注射什么?硫乙醇酸盐肉汤还是硫乙醇酸盐培养基?这两个有什么区别?急,希望大家给个正解
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 22:35:50
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硫乙醇酸盐肉汤和硫乙醇酸盐培养基的区别?
我想取小鼠腹腔巨噬细胞,请问应该给小鼠注射什么?硫乙醇酸盐肉汤还是硫乙醇酸盐培养基?这两个有什么区别?急,希望大家给个正解
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你好我请教一下,你的腹腔巨噬细胞培养成功了么 我的腹腔巨噬细胞用PBS取,用RMI-1640培养基 和太牛血清培养的总是不成功 ①取5-10只小鼠,颈椎脱臼处死,75%(体积分数)酒精浸泡3min,取出小鼠,置于培养皿内,腹面朝上；②用镊子提起小鼠下腹部皮肤,剪开一小口,撕开皮肤,完全暴露腹膜；③10mL注射器装上大号针头,吸入10mL预冷的无菌PBS缓冲溶液（pH 7.2-7.4）（0.02mol/L?）,用镊子提起腹膜,向腹腔中注入培养液,针尖朝上,避开肠和脂肪,回抽腹腔液,不同方向冲洗数次,吸出腹腔液；④细胞悬液于4℃1000r/min离心5-10分钟,用RPMI-1640培养液液洗一次,用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液悬浮细胞；⑤将细胞悬液接种于细胞培养平板上,37℃培养2-3小时后,轻轻吸弃上清,再用预热培养基洗3次,洗去未贴壁细胞,得纯化的小鼠腹腔巨噬细胞；⑥收集纯化的小鼠腹腔巨噬细胞,台盼蓝染色计数细胞并测定细胞活力,巨噬细胞含量由超显微镜观察计数得到；⑦将纯化细胞调整到一定的浓度（2×106细胞/mL,1×106细胞/mL or 5×105细胞/mL）,细胞悬液按1mL（100μL）/孔接种于无菌的24孔（96孔）塑料培养板中,37℃培养24小时后,备用,进行后面的实验研究.【⑤台盼蓝染色计数细胞并测定细胞活力；调整细胞浓度至2×106细胞/mL（1×106细胞/mL or 5×105细胞/mL）,细胞悬液按1mL（100μL）/孔接种于无菌的24孔（96孔）塑料培养板中,37℃培养2-3小时后,轻轻吸弃上清,再用预热培养基洗3次,洗去未贴壁细胞,得纯化的小鼠腹腔巨噬细胞,备用.想问问有什么问题 查看原帖>>