在用高效液相色谱仪时,我们那个定量管是2mL的,是不是意味着我每次都要进样2mL.而且进样之前管道是空的,就这样进样空气会不会进入柱子?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/26 15:02:19
在用高效液相色谱仪时,我们那个定量管是2mL的,是不是意味着我每次都要进样2mL.而且进样之前管道是空的,就这样进样空气会不会进入柱子?
在用高效液相色谱仪时,我们那个定量管是2mL的,是不是意味着我每次都要进样2mL.而且进样之前管道是空的,就这样进样空气会不会进入柱子?
在用高效液相色谱仪时,我们那个定量管是2mL的,是不是意味着我每次都要进样2mL.而且进样之前管道是空的,就这样进样空气会不会进入柱子?
请问你是使用什么牌子的高效液相色谱仪?我使用过安捷伦的和岛津的,定量管2ML但是实际进样量是根据你自己在仪器中设置的,一般为10-20UL,如果管道是空的那么不要上色谱柱,先用超声过的纯化水清洗系统,再根据所选择的色谱柱来选择下一个清洗系统的溶剂,如果你需要的流动相为乙腈那么使用甲醇清洗系统,也可以用乙腈,但是乙腈的价格是甲醇的4倍,所以一般用甲醇,冲洗完毕后上柱子,先脱气,然后再使用需要的流动相冲洗液（根据柱子来选择冲洗的液体）冲洗.一般冲洗的体积为柱子的10倍体积即可.然后上流动相和样品,再脱气,即可进样.（在任意一次断开系统循环之后一定要脱气,否则会引起走样的基线不稳或出现鬼峰或损伤色谱柱）特别要注意以下两种色谱柱冲洗液的选择（1.葡聚糖网状分子作为色谱柱的,不可使用有机溶剂清洗2.禁用水系溶剂的色谱柱）前一种情况会导致葡聚糖网状分子破裂,堵塞管路,后者会破坏色谱柱.都是极为麻烦的情况.现在的仪器都是自动进样的,在超声脱气和系统自动排气双保险之后基本没有空气进入柱子的可能,纯手打,
色谱图，其实简单地讲，是一个横坐标是时间，纵坐标是电信号的二维图谱。
高效液相色谱法，你可以简单地想象，固定相是一个多空海绵状的柱形结构，样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同，所以才会在色谱图中拉开距离。
和实验相关的参数：
1、保留时间
如果使用同样的色谱柱，同样的流动相，分析同样的样品，那么这个样品的保留时间，应该是固定的。不同保留时间的色谱峰，应该...
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色谱图，其实简单地讲，是一个横坐标是时间，纵坐标是电信号的二维图谱。
高效液相色谱法，你可以简单地想象，固定相是一个多空海绵状的柱形结构，样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同，所以才会在色谱图中拉开距离。
和实验相关的参数：
1、保留时间
如果使用同样的色谱柱，同样的流动相，分析同样的样品，那么这个样品的保留时间，应该是固定的。不同保留时间的色谱峰，应该表现出的是不同的物质。如果你跑的是反相色谱，那么色谱峰越靠后，它对应物质的极性也就越小。
2、峰面积
这是你在色谱图中可以读出来的参数，在同一个色谱条件下，同一个物质的浓度和峰面积是成正比的。也就是说，如果你配制1.0mg/ml的X物质，进样后峰面积是10000，那么，你配制0.5mg/ml的X物质，进样后峰面积差不多就是5000
3、波长
同一样品，同一方法，同一色谱柱，在不同波长的峰面积是不同的。一个物质指在某些特殊波长下有吸收。比如一个物质在210nm和254nm处有吸收。那么波长在280nm处可能无法检出该物质。所以一个实验方法开始时要进行波长扫描。
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