双缩脲试剂可以鉴定肝脏研磨液中的过氧化氢酶吗
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 05:36:45
双缩脲试剂可以鉴定肝脏研磨液中的过氧化氢酶吗
双缩脲试剂可以鉴定肝脏研磨液中的过氧化氢酶吗
双缩脲试剂可以鉴定肝脏研磨液中的过氧化氢酶吗
理论上当然可以.但肝脏研磨液中的酶含量特少,种类多,所以第一不好验证,再者即使是验证出来有酶也不一定验证出来的就是过氧化氢酶.还有肝脏研磨液的颜色太深,遮盖验证出来的蛋白质的颜色紫色,所以肉眼是判断不了的.
首先：双缩脲试剂与蛋白质作用后发生显色反应，呈现出紫色，而过氧化氢酶就是蛋白质。过氧化氢酶可以用双缩脲试剂鉴定，但是你不可以用研磨液直接去做，因为研磨液中还有其它的蛋白质，照样能发生显色反应。所以你必须分离出来或者直接做定量检测。
如果你要做定量检测的话，就要用钼酸铵法了。钼酸铵比色法原理是过氧化氢酶(CAT)可催化H2O2分解生成H2O和O2，体系中残留的H2O2再与钼酸铵作用生成黄色化...
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首先：双缩脲试剂与蛋白质作用后发生显色反应，呈现出紫色，而过氧化氢酶就是蛋白质。过氧化氢酶可以用双缩脲试剂鉴定，但是你不可以用研磨液直接去做，因为研磨液中还有其它的蛋白质，照样能发生显色反应。所以你必须分离出来或者直接做定量检测。
如果你要做定量检测的话，就要用钼酸铵法了。钼酸铵比色法原理是过氧化氢酶(CAT)可催化H2O2分解生成H2O和O2，体系中残留的H2O2再与钼酸铵作用生成黄色化合物，反应在很短时间即可达到平衡，并至少可稳定60min，其生成的黄色化合物在405nm处所呈现的吸光度取决于H2O2和钼酸铵的浓度。要先研磨，然后离心取上清测。
注意：由于酶很容易分解，所以样本要尽快测试，要不然就先在-80度冰箱冻起来。
我刚做过这个实验的，当然是直接买了试剂盒做的。
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可以，过氧化氢酶属于蛋白质，其中的肽键可以在碱性环境下与铜离子结合生成紫色络合物。