纸色谱发有纸色谱法有什么作用
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 18:12:28
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薄层色谱版
http://www.instrument.com.cn/bbs/forum_29.htm
色谱法又可根据分离方法分为:纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等.
所用溶剂应与供试品不起化学反应,纯度要求较高.分析时的温度,除气相色谱法或另有规定外,系指在室温操作.分离后各成分的检出,应采用各品种项下所规定的方法.
采用纸色谱法、薄层色谱法或柱色谱法分离有色物质时,可根据其色带进行区分,分离无色物质时,可在短波(254nm)或长波(365nm)紫外光灯下检视,其中纸色谱或薄层色谱也可喷以显色剂使之显色,或在薄层色谱中用加有荧光物质的薄层硅胶,采用荧光猝灭法检视;柱色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法可用接于色谱柱出口处的各种检测器检测;柱色谱法还可分部收集流出液后用适宜方法测定.
从操作和原理方面讲纸色谱法:
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? 以纸为载体,用单一溶剂或混合溶剂进行分配.亦即以纸上所含水分或其他物质为固定相,用流动相进行展开的分配色谱法.
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? 所用滤纸应质地均匀平整,具有一定机械强度,必须不含会影响色谱效果的杂质,也不应与所用显色剂起作用,以免影响分离和鉴别效果,必要时可作特殊处理后再用. 试样经层析后可用比移值(Rf)表示各组成成分的位置(比移值=原点中心至色谱斑点中心的距离与原点中心至流动相前沿的距离之比),由于影响比移值的因素较多,因此一般采用在相同实验条件下对照物质对比以确定其异同.作为单体鉴别时,试样所显主色谱斑点的颜色(或荧光)与供置,应与对照(标准)样所显主色的谱斑点或供试品-对照品(1∶1)混合所显的主色谱斑点相同.作为质量指标(纯度)检查时,可取一定量的试样,经展开后,按各单体的规定,检视其所显杂质色谱斑点的个数或呈色(或荧光)的强度.作为含量测定时,可将色谱斑点剪下洗脱后,再用适宜的方法测定,也可用色谱扫描仪测定. 1、下行法 所用色谱缸一般为圆形或长方形玻璃缸,缸上有磨口玻璃盖,应能密闭,盖上有孔,可插入分液漏斗,以加入流动相.在近缸顶端有一用支架架起的玻璃槽作为流动相的容器,槽内有一玻璃棒,用以支持色谱滤纸使其自然下垂,避免流动相沿滤纸与溶剂槽之间发生虹吸现象.
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? 取适当的色谱滤纸按纤维长丝方向切成适当大小的纸条,离纸条上端适当的距离(使色谱纸上端能足够浸入溶剂槽内的流动相中,并使点样基线能在溶剂槽侧的玻璃支持棒下数厘米处)用铅笔划一点样基线,必要时色谱纸下端可切成锯齿形,以便于流动相滴下. 将试样溶于适当的溶剂中,制成一定浓度的溶剂.用微量吸管或微量注射器吸取溶剂,点于点样基线上,溶液宜分次点加,每次点加后,俟其自然干燥、低温烘干或经温热气流吹干.样点直径一般不超过0.5cm,样点通常应为圆形.
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? 将点样后的色谱滤纸上端放在溶剂槽内,并用玻璃棒压住,使色谱纸通过槽侧玻璃支持棒自然下垂,点样基线在支持棒下数厘米处.色谱开始前,色谱缸内用各单体中所规定的溶剂的蒸气饱和,一般可在色谱缸底部放一装有流动相的平皿,或将浸有流动相的滤纸条附着在色谱缸的内壁上,放置一定时间,俟溶剂挥发使缸内充满饱和蒸气.然后添加流动相,使浸没溶剂槽内滤纸,流动相即经毛细管作用沿滤纸移动进行展开至规定距离后,取出滤纸,标明流动相前沿位置,俟流动相挥散后按规定方法检出色谱斑点.
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? 2、上行法 色谱缸基本和下行法相似,唯除去溶剂槽和支架,并在色谱缸盖上的孔中加塞,塞中插入玻璃悬钩,以便将点样后的色谱滤纸挂在钩上.色谱滤纸一般长约25cm,宽度则视需要而定.必要时可将色谱滤纸卷成筒形.点样基线距底边约2.5cm,点样方法与下行法相同.色谱缸内加入适量流动相,放置,俟流动相蒸气饱和后,再下降悬钩,使色谱滤纸浸入流动相约0.5cm,流动相即经毛细管作用沿色谱滤纸上升,除另有规定外,一般展开至15cm后,取出晾干,按规定方法检视.
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? 色谱可以向一个方向进行,即单向色谱;也可进行双向色谱,即先向一个方向展开,取出,俟流动相完全挥发后,将滤纸转90°,再用原流动相或另一种流动相进行展.亦可多次展开,连续展或径向色谱等.
以下为一些资源,希望能够帮助您对纸色谱有更深刻的了
纸色谱法及其应用.rar
http://www.instrument.com.cn/download/shtml/109888.shtml
色谱分析法基本原理
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20080810/1412620/
色谱技术简介
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060323/372007/
纸色谱和薄层色谱
http://www.instrument.com.cn/download/shtml/010425.shtml
色谱图书库(电子版)
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090812/2055222//index_3.shtml
色谱法基础知识与理论
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20071022/1029183/