klenow酶与大肠杆菌DNA聚合酶I在结构上和功能上的主要区别是什么?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/17 13:45:53
klenow酶与大肠杆菌DNA聚合酶I在结构上和功能上的主要区别是什么?
klenow酶与大肠杆菌DNA聚合酶I在结构上和功能上的主要区别是什么?
klenow酶与大肠杆菌DNA聚合酶I在结构上和功能上的主要区别是什么?
Klenow酶是 Hans Klenow 1970年用枯草杆菌蛋白酶处理大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ时,得到的两个片段中分子量较大的一个,它含有605个氨基酸残基(324～928),并有大小两个结构域,其中大结构域(518～928)具有5'→3'聚合酶活性,小结构域(324～517)则具有3'→5'外切酶活性.缺少一个5’-3‘的外切酶活性,5’-3‘的外切酶活性在蛋白质的N端,枯草杆菌蛋白酶切掉N端使其丧失该活性.
功能上的区别：DNA聚合酶I可通过DNA缺口平移的方法制备DNA探针.而klenow酶主要用于缺口平移标记DNA,也用于DNA的缺口补平和延伸.还在cDNA克隆中用于第二条cDNA链的合成.
Klenow酶实际上应该叫做klenow fragment (klenow 片段），它实际上是大肠杆菌DNA聚合酶I经过枯草蛋白酶或者胰蛋白酶水解后得到的一个片段。这个片段具有5‘-3’端的DNA聚合酶活性和3‘-5’端的外切酶活性，但比起大肠杆菌DNA聚合酶I，缺少一个5’-3‘的外切酶活性。在基因工程中，klenow片段经常被用于双链DNA粘性末端的补平。...
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Klenow酶实际上应该叫做klenow fragment (klenow 片段），它实际上是大肠杆菌DNA聚合酶I经过枯草蛋白酶或者胰蛋白酶水解后得到的一个片段。这个片段具有5‘-3’端的DNA聚合酶活性和3‘-5’端的外切酶活性，但比起大肠杆菌DNA聚合酶I，缺少一个5’-3‘的外切酶活性。在基因工程中，klenow片段经常被用于双链DNA粘性末端的补平。
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