限制性内切酶为什么能检测碱基序列改变
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/15 10:23:20
限制性内切酶为什么能检测碱基序列改变
限制性内切酶为什么能检测碱基序列改变
限制性内切酶为什么能检测碱基序列改变
例如限制酶MstⅡ所识别的DNA碱基序列是CCTGAGG,而这是正常β珠蛋白基因(βA)第6个密码子及其前后的碱基序列.经MstⅡ切开,形成1.15kb和0.2kb两个片段.但当正常β珠蛋白基因突变为镰形细胞贫血基因(βS)时,第6个密码子GAG突变为GTG,于是CCTGAGG变成 CCTGTGG,而不能被MstⅡ所识别,以致酶切时产生1.35kb的DNA片段.据此,可以对镰形细胞贫血症进行诊断.镰刀形细胞性贫血症的基因诊断
一.可采用PCR-限制性内切酶谱分析法,先用PCR从患者基因组DNA扩增含突变位点的珠蛋白基因片段,再选择适当的限制性内切酶水解PCR产物,根据酶切产物在电泳图谱上的片段数量和大小做出判断.二,也可与特意的寡核苷酸探针进行Southern印记杂交分析,根据杂交图谱做出判断.三, PCR扩增后直接测序；四变性高效液相色谱法. 例1镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变.检测这种碱基序列必须用的酶是 A．解旋酶
B．DNA连接酶
C．限制性内切酶
D．RNA聚合酶例2MstⅡ是一种限制性内切酶,它总是在CCTGAGG的碱基序列中切断DNA.下图显示用MstⅡ处理后的突变型 血红蛋白基因片段.镰刀型细胞贫血症的根本原因是 血红蛋白发生基因突变,使某一处CCTGAGG突变为CCTGTGG.下列有关叙述错误的是 （ ）
____________ ________________ ___________A．利用Mst 1I酶进行基因诊断,该过程是在细胞外进行的
B．将MstⅡ酶用于基因诊断,若产生四个DNA片段,则 血红蛋白基因是正常的
C．在起初的正常 血红蛋白基因中有4个CCTGAGG序列
D．镰刀型细胞贫血症患者的成熟红细胞中没有MstⅡ酶的识别序列【答案】C【解析】：基因诊断的方法不再说了图示显示MstⅡ处理后的突变型 血红蛋白基因片段有3段,正常的 血红蛋白基因比异常的多了一个MstⅡ的识别序列,若用MstⅡ酶进行基因诊断,会多出1个DNA片段,说明正常 血红蛋白基因中有3个CCTGAGG序列.