DNA在细胞内复制和在体外扩增所需的引物相同吗
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/08 07:29:26
DNA在细胞内复制和在体外扩增所需的引物相同吗
DNA在细胞内复制和在体外扩增所需的引物相同吗
DNA在细胞内复制和在体外扩增所需的引物相同吗
观点:不同.DNA在细胞内复制引物是RNA短链,在体外扩增（PCR）需要DNA单链引物.观点来自： “聚合酶只能催化脱氧核糖核苷酸加到已有核酸链的游离3'-羟基上,而不能使脱氧核糖核苷酸自身发生聚合,也就是说,它需要引物链(primer strand)的存在.”“综上所述,DNA聚合酶的反应特点为:……反应需要有引物3'-羟基存在……”\x0d“与其他种类的DNA聚合酶一样大肠杆菌DNA聚合酶I只能在已有核酸链上延伸DNA链,而不能从无到有开始DNA链的合成,也就是说,它催化的反应需要有引物链（DNA链或RNA链）的存在.”（本人注:主要起复制作用的是DNA聚合酶III,不过它同样需要有3'-OH的引物链存在）\x0d“如前所述,所有已知的DNA聚合酶都不能发动新链的合成,而只能催化已有链的延长反应.然而RNA聚合酶则不同,它只需要DNA模板存在,就可以在其上合成出新的RNA链.这就是说,DNA合成需要引物,RNA合成不需要引物.那么,每一个冈崎片段是怎样开始合成的?它的引物是什么?现在知道,在DNA模板上需先合成一段RNA引物（催化该反应的酶称为引物合成酶.引物的长度通常是几个核苷酸至10多个核苷酸,DNA聚合酶III可在其上聚合脱氧核糖核苷酸,直至完成冈崎片段的合成.RNA引物的消除和缺口的填补是由DNA聚合酶I来完成的.最后由DNA连接酶将冈崎片段连成长链.）,DNA聚合酶从RNA引物的3'-OH端开始合成新的DNA链.”\x0d“DNA的体外酶促合成必须加入少量的DNA才能进行.由于DNA在提取过程中常受到机械切力或酶的作用,从而引起磷酸二酯键的断裂.……显露出3'-羟基的核酸链可作为引物,链延长的信息来自对应的互补链.由此可见,在DNA聚合酶反应中,加入的DNA同时起两者作用：一条链作为引物,另一条链作为模板.” 以上引自：王镜岩等.生物化学(下册).高等教育出版社.第三版.412~418.