关于碱性磷酸酶CIAP的使用购买了TAKARA的碱性磷酸酶,失活处理时要求使用苯酚抽提,最后回收沉淀时要求减压干燥,不知道减压干燥是何意?必须减压吗?PS,问师姐说可以用胶回收代替苯酚抽提,可
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/24 21:19:43
关于碱性磷酸酶CIAP的使用购买了TAKARA的碱性磷酸酶,失活处理时要求使用苯酚抽提,最后回收沉淀时要求减压干燥,不知道减压干燥是何意?必须减压吗?PS,问师姐说可以用胶回收代替苯酚抽提,可
关于碱性磷酸酶CIAP的使用
购买了TAKARA的碱性磷酸酶,失活处理时要求使用苯酚抽提,最后回收沉淀时要求减压干燥,不知道减压干燥是何意?必须减压吗?
PS,问师姐说可以用胶回收代替苯酚抽提,可胶回收的DNA损失很大,做连接也没成功,很郁闷呢,
关于碱性磷酸酶CIAP的使用购买了TAKARA的碱性磷酸酶,失活处理时要求使用苯酚抽提,最后回收沉淀时要求减压干燥,不知道减压干燥是何意?必须减压吗?PS,问师姐说可以用胶回收代替苯酚抽提,可
减压干燥就是用减压干燥器对微量生物样品进行干燥.常用的就是Eppendorf的concentrator系列减压干燥器.不减压靠室温干燥时间过长.
你胶回收的时候你要的带的DNA量你可以估计一下,然后换算成摩尔数,加载体的时候也计算一下载体的量,二者5：1比例以上混合后连接.
使用CIAP主要是为了防止载体自连，若你的载体分子量够大，回收时直接用1/10V醋酸钠和2V无水乙醇重新沉淀即可。减压干燥只是使干燥速度变快，其实常温常压干燥也是可以的。
胶回收确实会比较纯净，不过回收率较低，不很经济。最后连接时要换算成物质的量，载体：插入片段在1:5~10比较好，不过使用CIAP后，载体自连率降低了，比值可以加大些，1:1~5都是可以的，试试看吧。...
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使用CIAP主要是为了防止载体自连，若你的载体分子量够大，回收时直接用1/10V醋酸钠和2V无水乙醇重新沉淀即可。减压干燥只是使干燥速度变快，其实常温常压干燥也是可以的。
胶回收确实会比较纯净，不过回收率较低，不很经济。最后连接时要换算成物质的量，载体：插入片段在1:5~10比较好，不过使用CIAP后，载体自连率降低了，比值可以加大些，1:1~5都是可以的，试试看吧。
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