基因克隆中有关点突变引物设计问题我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子(每次突变一个氨基酸密码子),突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/29 08:20:11
基因克隆中有关点突变引物设计问题我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子(每次突变一个氨基酸密码子),突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位
基因克隆中有关点突变引物设计问题
我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子(每次突变一个氨基酸密码子),突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位高手引物设计中要注意哪些问题
若是在下游引物末端几个碱基发生突变(假设以酶切位点为前端)需要在末端留多少个与模板吻合的碱基呢?那样引物不是会很长……
基因克隆中有关点突变引物设计问题我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子(每次突变一个氨基酸密码子),突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位
退火温度,碱基数目20个左右,不要有形成发夹结构的碱基序列,GC含量要大于60%.
楼上说的不错。告诉你一个网站,http://frodo.wi.mit.edu/primer3/,在线设计引物,网站里面提到的变量就是你要注意的地方。你把模板序列,要求的碱基长度(一般16-20),退火温度,等信息都输进去,就会计算出最合适的引物,还有几对给你候选。我们实验室每年2-3篇Nature,Science,也是用这个来设计引物的,呵呵...
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楼上说的不错。告诉你一个网站,http://frodo.wi.mit.edu/primer3/,在线设计引物,网站里面提到的变量就是你要注意的地方。你把模板序列,要求的碱基长度(一般16-20),退火温度,等信息都输进去,就会计算出最合适的引物,还有几对给你候选。我们实验室每年2-3篇Nature,Science,也是用这个来设计引物的,呵呵
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