TLC薄层色谱法.将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/28 15:37:41
TLC薄层色谱法.将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱
TLC薄层色谱法.
将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱和,并且立即用同样的混合溶剂展开至约15cm.用冷空气流干燥薄层板,置于碘蒸气中显色直至得到对照液的主斑点,在254nm处用紫外光检测.
以上是原文省去了供试液等的制备及最后结果的判断.
我有以下疑问望各位前辈给予指点：
1、“并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟”,这个15分钟是怎么样放置的?层析室中是要放展开剂吗?如果是的话,那不是已经开始展开了吗,何必下面又来句同样的混合溶剂展开15cm呢?这点到底应该怎么操作呢?我以前做其它样品的时候是点完样之后直接展开15cm的,没有要求放置15分钟.
2、“层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱和”,如果按展开剂8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的话,展开样品的时候,岂不是已经超过点样点了吗?展开剂不是不能够超过点样的位置吗?我是否可以把比例放小?既然能够放小为何又说8：8：84呢,直接说2：2：21呢?
3、我在没有放置15分钟和展开剂按2：2：21得时候,分离效果不是很好,分不开.
TLC薄层色谱法.将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱
1.点样板入展开缸但不接触展开剂,使点样板在缸中饱和后进行展开.这样Rf值相对小,层析效果比较好.
具体操作可以是将层析缸倾斜,放入点样板使其不接触展开剂,加盖并用凡士林防滑密封,15分钟后,轻轻放平层析缸.
2.可以通过调节层析缸倾斜角度来控制; 或配展开液后,取适量移入缸内
3.分不开或拖尾可能是没有进行饱和,你可以提前配好展开剂,比如早晨先配好,然后处理样品;还有甲醇,乙酸乙酯很容易挥发所以展开剂的比例不可以太小;样点不要太大;
还有,不是每个分析所用的展开剂都是最合适的;再说样品杂志可能很多,对比一下对照品.