如何利用紫外线作为诱变育种的诱变剂

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/25 21:55:09
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如何利用紫外线作为诱变育种的诱变剂
如何利用紫外线作为诱变育种的诱变剂

如何利用紫外线作为诱变育种的诱变剂
紫外线是波长136~390毫微米的短于紫外波长的射线,它是一种非电离辐射,能使被照射物质的分子或原子中的内层电子提高能级跃迁到能量高的外层轨道(称为激发),导致分子的理化变化.DNA分子上的碱基对强烈吸收紫外线,而且嘧啶比嘌呤敏感100倍.紫外线辐射能引起DNA链的断裂、DNA分子内和分子间的交联、核酸与蛋白质的交联,以及胞嘧啶和尿嘧啶的水合作用等,但最主要的则是形成嘧啶二聚体,他会阻碍双链的解链和复制,阻碍碱基的正常配对,从而导致基因突变.它的遗传效应主要是引起GC→AT 的转换或移码突变.由于存在光复活作用,即白光照射能活化光激活酶并将嘧啶二聚体解开而使DNA恢复正常,故辐照和处理后的培养应避免可见光照射(应在红光下操作).测定紫外光的剂量有直接法(以尔格/平方毫米表示绝对剂量)和间接法(以辐照时间或致死率作为相对剂量)两种.微生物所受射线的剂量决定于灯的功率、照射距离和时间.如果功率和距离是固定的话,则剂量就和照射的时间成正比,故照射时间的长短可作为相对剂量.一般用15W的紫外灯,距离固定在30厘米左右,选用致死率达90~99.9%所需的辐射时间进行诱变处理.但各类微生物所需的最适时间不同,一般营养体需辐照3~5分钟,芽孢要10分钟,芽孢杆菌的营养体要1~3分钟,革兰氏阳性菌和无芽孢菌较易杀死,用30秒,放线菌的分生孢子用30秒~2分钟.辅射不宜在肉汤等成分复杂的液体中进行,以免化学反应的干扰;同时要有电磁搅拌设备,以求照射均匀,尤其在菌液浓度较大或菌体、孢子等较大而重时很容易在处理期间发生沉降,此时电磁搅拌更显重要.照射前紫外灯宜先开灯预热20~30分钟,使光波稳定.