制片染色前为什么要进行固定?固定时应该注意什么问题?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/24 11:47:35
制片染色前为什么要进行固定?固定时应该注意什么问题?
制片染色前为什么要进行固定?固定时应该注意什么问题?
制片染色前为什么要进行固定?固定时应该注意什么问题?
你说的太高深了,上面那位应该没到那个程度吧
如果实施做临时装片的话,注意方式气泡产生应该是首要问题吧,其次动物细胞要加生理盐水,防止细胞破裂,植物细胞就加水就行了,因为有细胞壁的支撑嘛.然后先别将水吸干,在一侧滴上染色剂,用吸水纸在另一旁吸水,这都是常规操作了,稍作注意就行了
如果是做永久装片的话我有一个制水螅的方法
1．波因氏固定液的配制 75毫升苦味酸饱和水溶液中加入25毫升甲醛,在临用时再加入5 毫升冰乙酸.
2．固定 固定水螅时,先在表面皿里面放少量水,然后用吸管把水螅从培养缸中吸出,放在表面皿内.等水螅身体和触手慢慢伸展后,用加热的波因氏液（30～34℃）固定.固定液要多一些,倾倒时要迅速,也可用吸管吸取加热的波因氏液浇射在水螅上,浇射的方向必须从基部到触手端,浇射的时间必须极短,不要把固定液滴入水内,这样水螅才不至于收缩.在波因氏固定液中固定4～8小时.
3．浸入70%乙醇中,每天更换一次70%乙醇,直到洗去标本上因固定液而染上苦味酸的黄色为止.如果需要快一些去色,可以加1～2滴氨水.
如果使用氨水去色,则在黄色除去后,仍应该换两次70％乙醇,以除去氨水的碱性.
4．染色 浸入硼砂洋红染液（配制方法参见本书第836页）中,染24小时.
5．褪色 用1%盐酸乙醇褪色,时间为0．5～1分钟,褪到内部器官能看清楚为止.
6．脱水 依次浸入70％乙醇、80%乙醇、95%乙醇及无水乙醇.
7．透明 用二甲苯透明.中途更换一次新液,至透明为止.
8．封片 用树胶封片,树胶可以浓一些.
注意事项
1．制作水螅整体装片最重要的步骤是固定,如果这一步骤处理不好,水螅的触手和身体都会收缩,制成的标本就不能使用,所以采取有效的方法来固定是成功的关键.
2.在制作水螅装片时要非常小心,稍不注意就会弄碎或折断触手,特别在二甲苯中更容易弄碎或折断,所以在整个制作过程中,尽可能少用镊子夹镊,也不宜多次更换盛器,最好只换溶液（如乙醇、二甲苯）不换盛器
3．褪色时,标本不能在盐酸乙醇中停留过久,否则颜色会全部褪尽.
参考一下吧