革兰氏染色的关键步骤是什么
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 20:25:56
革兰氏染色的关键步骤是什么
革兰氏染色的关键步骤是什么
革兰氏染色的关键步骤是什么
革兰氏染色四大基本步骤:
结晶紫初染
碘液媒染
乙醇脱色
沙黄复染
其中乙醇脱色是关键
因为如果脱色过度,有可能会使革兰氏阳性菌呈假阴性
如果脱色不够,有可能使革兰氏阴性菌呈假阳性
革兰氏染色法的主要步骤是先用结晶紫进行初染,再加媒染剂—碘液,以增加染料与细胞间的亲和力,使结晶紫与碘形成分子量较大的复合物,然后用脱色剂(乙醇或丙酮)脱色,最后用番红复染。凡细胞不被脱色而保留初染剂的颜色(紫色)者为革兰氏阳性菌,如被脱色后有染上复染剂的颜色(红色)者为革兰氏阴性菌。
一般乙醇脱色的时间为30s,如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可能被脱去颜色而被误认为是革兰氏阴性菌;相反,如...
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革兰氏染色法的主要步骤是先用结晶紫进行初染,再加媒染剂—碘液,以增加染料与细胞间的亲和力,使结晶紫与碘形成分子量较大的复合物,然后用脱色剂(乙醇或丙酮)脱色,最后用番红复染。凡细胞不被脱色而保留初染剂的颜色(紫色)者为革兰氏阳性菌,如被脱色后有染上复染剂的颜色(红色)者为革兰氏阴性菌。
一般乙醇脱色的时间为30s,如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可能被脱去颜色而被误认为是革兰氏阴性菌;相反,如果时间不够,革兰氏阴性菌未被完全脱色而被认为是革兰氏阳性菌。
染色时间一般控制在1min。
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结晶紫初染、碘液媒染、乙醇脱色、番红复染四步都很重要,关键是控制好每一步骤的时间,分分半半。
实验方法
步骤
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方
法是: 1)涂片固定。 2)草酸铵结晶紫染1分钟。 3)自来水冲
洗。 4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5)水洗,用吸水纸吸去水分。
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。
7)蕃红染色液(稀)染2分钟后,...
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实验方法
步骤
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方
法是: 1)涂片固定。 2)草酸铵结晶紫染1分钟。 3)自来水冲
洗。 4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5)水洗,用吸水纸吸去水分。
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。
7)蕃红染色液(稀)染2分钟后,自来水冲洗。干燥,镜检。
G+菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱
水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。
Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙
醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色。
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