分离与鉴定蛋白质已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,其等电点为6.8-6.9,植物叶绿体内存在另一蛋白B分子量为73KD,具有四个相同的亚基,等电点为8.2-8

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/22 09:44:06
分离与鉴定蛋白质已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,其等电点为6.8-6.9,植物叶绿体内存在另一蛋白B分子量为73KD,具有四个相同的亚基,等电点为8

分离与鉴定蛋白质已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,其等电点为6.8-6.9,植物叶绿体内存在另一蛋白B分子量为73KD,具有四个相同的亚基,等电点为8.2-8
分离与鉴定蛋白质
已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,其等电点为6.8-6.9,植物叶绿体内存在另一蛋白B分子量为73KD,具有四个相同的亚基,等电点为8.2-8.3,如何分离和鉴别该植物叶绿体蛋白A?

分离与鉴定蛋白质已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,其等电点为6.8-6.9,植物叶绿体内存在另一蛋白B分子量为73KD,具有四个相同的亚基,等电点为8.2-8
1.破碎细胞(简单 自己查资料)
2.提取纯化叶绿体(简单 自己查资料)
3.用pH 8.25 缓冲液 破碎叶绿体
4.离心去除沉淀(沉淀含有蛋白B)收集上清液(含有蛋白A)
5.缓慢调解上清液pH 到6.8-6.9,离心 收集沉淀(含有蛋白A)
6.用pH 到6.8-6.9的缓冲液洗涤沉淀.离心收集沉淀.
7.最后溶解于pH 7.6-7.8 的 比如pBS 中
8.鉴定 SDS-PAGE (加2mer 等还原剂),电泳 观察条带数目和分子量

大小一样,跑电泳肯定是不行了!不知道还有没有其他的区别?
蛋白质、多肽均属于两性电解质,在缓冲液pH小于其等电点时,带净正电荷,而在缓冲液pH大于其等电点时,带净负电荷。阳离子交换凝胶本身带负电荷基团。由于静电相互作用而使样品结合到凝胶上,再更换缓冲液的pH值进行洗脱
就目前给出的条件,采用阳离子交换色谱,酸性条件下挂柱。
更换缓冲液的pH(本实验设置在7-8之间)值进行洗...

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大小一样,跑电泳肯定是不行了!不知道还有没有其他的区别?
蛋白质、多肽均属于两性电解质,在缓冲液pH小于其等电点时,带净正电荷,而在缓冲液pH大于其等电点时,带净负电荷。阳离子交换凝胶本身带负电荷基团。由于静电相互作用而使样品结合到凝胶上,再更换缓冲液的pH值进行洗脱
就目前给出的条件,采用阳离子交换色谱,酸性条件下挂柱。
更换缓冲液的pH(本实验设置在7-8之间)值进行洗脱。

收起

进行双向电泳分析

分离与鉴定蛋白质已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,其等电点为6.8-6.9,植物叶绿体内存在另一蛋白B分子量为73KD,具有四个相同的亚基,等电点为8.2-8 植物中的元素的分离与鉴定 下列生理活动与蛋白质功能无关的是 A氧气在血液中的运输 B二氧化碳进入叶绿体 C质壁分离C与什么有关啊 ①生物组织中还原糖的鉴定 ②生物组织中脂肪的鉴定 ③生物组织中蛋白质的鉴定 ④观察植物细胞的质壁分离和复原 ⑤叶绿体中色素的提取和分离 ⑥观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 ⑦探 如何将植物核基因组与叶绿体基因组进行分离? 叶绿体和植物细胞的分离与复原有关吗? 如何分离鉴定一个未知蛋白 如何分离鉴定一个未知蛋白 怎样分离并鉴别某种植物中的所有蛋白质成分? 如从植物中分离叶绿体,应如何操作?与分离线粒体有何不同? 纸层析法分离叶绿体色素的原理是不同色素在层析液中溶解度不同 怎么错了鉴定蛋白质时,要先将双缩腺试剂A和B混合均匀后,再加入组织样液 质壁分离与复原 实验能鉴定蛋白质、淀粉、纤维素的亲水性依次递减吗 鉴定植物细胞后含物,通常( )A、用碘液鉴定蛋白质和脂肪 B、用苏丹Ⅲ鉴定蛋白质和脂肪C、用碘液鉴定蛋白质和淀粉 D、用苏丹Ⅲ鉴定淀粉和脂肪 高中生物问题叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离的实验目的是()A,观察各种色素的吸收光谱B,验证叶绿体中色素的种类和各种色素的颜色C,提取高等植物叶绿体中的色素D,用 如何从植物基因组中分离并鉴定某个已知基因 植物细胞中的核糖体和叶绿体都能合成蛋白质 这句话对吗 叶绿素中色素的提取与分离对于“叶绿素中色素的提取与分离”实验的描述中,“提取高等植物叶绿体中的色素” 属于实验要求吗? 下列与蛋白质功能无直接关系的是A.细胞分裂间期DNA的复制   B.人体肺泡中的O2被运输到肝细胞C.植物细胞质壁分离及复原     D.胰岛素降低血糖浓度