棉花导入抗体基因的步骤,
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/26 00:24:55
棉花导入抗体基因的步骤,
棉花导入抗体基因的步骤,
棉花导入抗体基因的步骤,
所用技术为基因工程,下面是四个步骤（就将抗体基因导入棉花细胞说）：
①提取目的基因
基因工程的第一步,是取得人们所需要的抗体基因,也就是目的基因（如下图：基因工程的基本内容）.
获得抗体基因主要有两条途径：
一条是从供体细胞的DNA中直接分离出抗体基因,如“散弹射击法”；
另一条是人工合成抗体基因,目前人工合成基因的方法主要有两条途径：一条途径是以抗体基因转录形成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需要的基因.另一条途径是根据已知的蛋白质的氨基酸序列,推测出它的结构基因的核苷酸序列,再通过化学方法,以单核苷酸为原料合成抗体基因.
②目的基因与运载体结合
将抗体基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程.如果以质粒作为运载体,首先要用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个切口,露出黏性末端.然后用同一限制酶切断抗体基因,使其产生相同的黏性末端.将切下的抗体基因的片段插入质粒的切口处,再加入适量DNA连接酶,质粒的黏性末端与抗体基因DNA片段的黏性末端就会因碱基互补配对而结合,形成了一个重组DNA分子（也叫重组质粒）.
③将抗体基因导入受体细胞
抗体基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后,下一步是将重组DNA分子引入棉花细胞中进行扩增.
用人工的方法使体外重组的DNA分子转移到棉花细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径.
④抗体基因的检测和表达
虽然用一定的方法已经检测出棉花植株中含有抗体基因,但让棉铃虫食用棉花的叶片时,棉铃虫并没有被杀死,这说明抗体基因还不能在高等植物中表达.科学家在研究的基础上,又一次对棉花植株中的抗体基因进行了修饰,然后再让棉铃虫食用棉花的叶片,结果使用第二天棉铃虫就中毒死亡了.这说明抗体基因在棉花植株中得到了表达.
先获取要导入的目的基因（含抗体基因的）
然后构建表达载体，就是和一个能当载体的DNA结合
然后导入（农杆菌转化法或基因枪法或花粉管通道法）
最后检测标记基因