只有一台分光光度计,怎么对核酸进行定性鉴别和定量测定?

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/11/24 10:32:11

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只有一台分光光度计,怎么对核酸进行定性鉴别和定量测定?
只有一台分光光度计,那应该题目是说没有酸溶性核苷酸和低聚多核苷酸吧,这些都是要用钼酸铵-过氯酸沉淀剂,沉淀除去大分子核酸,因为用分光光度计是不允许有沉淀的.
将样品配制成一定浓度的溶液（20~50μg/mL）,选取比色杯厚度为1CM,在紫外分光光度计上直接测定260NM和280NM的OD值.
若OD260/OD280在2.0以上,为RNA,若在1.9左右,为DNA.
计算含量：RNA浓度=OD260/（0.024*L）*稀释倍数（微克/毫升）
DNA=OD260/（0.020*L）*稀释倍数
其中,OD260为260nm波长处光密度读数；L为比色杯的厚度；0.024为每毫升溶液内含1微克RNA的光密度；0.020为每毫升溶液内含1微克DNA钠盐时的光密度.
PS：选 260NM计算是因为核酸（DNA,RNA）的最大紫外吸收值在260nm 处.

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