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来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/24 10:17:57
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跪求DNA甲基化、去甲基化的具体操作流程
如题,跪求DNA甲基化和去甲基化的具体操作步骤(包括所用酶和试剂等,最好是能写上实验报告的那种).
百度知识堂里面有,但是我需要更加详细和可操作(他只是说明了DNA甲基化用酶和概论,并没有给出具体实验步骤)
总之:我要实验步骤!先谢谢各位大虾了!
分不在高,先出50.如果满意我会再加!谢谢!

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金属的甲基化和去甲基化反应一般是有微生物参与的,过程中由于微生物介导的电子传递,使甲基去除,或获得.如:Hg的甲基化是在SRB硫酸盐还原菌,IB铁细菌等参与下实现的,通常维生素B等可以提供微生物的碳源,同时也是甲基的供应者.
DNA甲基化(DNA methylation)
在甲基转移酶的催化下,DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5�甲基胞嘧啶,这常见于基因的5’-CG-3’序列.大多数脊椎动物基因组DNA都有少量的甲基化胞嘧啶,主要集中在基因5’端的非编码区,并成簇存在.甲基化位点可随DNA的复制而遗传,因为DNA复制后,甲基化酶可将新合成的未甲基化的位点进行甲基化.DNA的甲基化可引起基因的失活.
结构基因含有很多CPG 结构,2CPG 和2GPC 中两个胞嘧啶的5 位碳原子通常被甲基化,且两个甲基集团在DNA 双链大沟中呈特定三维结构.基因组中60%~90% 的CPG 都被甲基化,未甲基化的CPG 成簇地组成CPG 岛,位于结构基因启动子的核心序列和转录起始点.有实验证明超甲基化阻遏转录的进行.DNA 甲基化可引起基因组中相应区域染色质结构变化,使DNA 失去核酶ö限制性内切酶的切割位点,以及DNA 酶的敏感位点,使染色质高度螺旋化,凝缩成团,失去转录活性.5 位C 甲基化的胞嘧啶脱氨基生成胸腺嘧啶,由此可能导致基因置换突变,发生碱基错配:T2G,如果在细胞分裂过程中不被纠正,就会诱发遗传病或癌症,而且,生物体甲基化的方式是稳定的,可遗传的.
希望我的答案您能够满意!

这个有点高深哈,你可以找个生物论坛去问问高手。