花药离体培养中花药应该怎样消毒?大哥你们不会就不要胡说好吗?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/25 12:53:20
花药离体培养中花药应该怎样消毒?大哥你们不会就不要胡说好吗?
花药离体培养中花药应该怎样消毒?
大哥你们不会就不要胡说好吗?
花药离体培养中花药应该怎样消毒?大哥你们不会就不要胡说好吗?
指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体）,在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下,得以生长和分化的一种无菌培养技术.该词最早仅局限用于离体部分增殖形成愈伤组织,现在一般通用于所有类型的植物无菌培养技术.包括：幼苗及较大的植株的培养（植物培养）；离体器官的培养（器官培养）；成熟或未成熟的胚胎的离体培养（胚胎培养）；离体部分增殖形成愈伤组织的培养（愈伤组织培养,即狭义的组织培养）；离体花药的培养（花药培养）；能保持较好分散性的离体细胞或很小的细胞团的液体培养（悬浮培养）；对脱壁的裸露细胞即原生质体的培养（原生质体培养）等.由于培养的部分是离体的,不受体内其它部分干扰,并给以特定的条件,因此,该技术可作为一种手段,研究生长发育和分化的规律.在生产实践中,已用于有经济价值的植物的快速繁殖、培养无病毒植株（分生组织一般不受病毒侵染,故可用茎尖培养产生无病毒植株,如马铃薯）、药用植物和其它有价值的天然产物的工厂化生产以及育种工作等方面.植物组织培养即植物无菌培养技术,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官、组织或细胞,如根、茎、叶、花、果实、种子、胚、胚珠、子房、花药、花粉以及贮藏器官的薄壁组织、维管束组织等,在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根,最后形成完整的植株.至今,世界各国在无性系繁殖、花卉育种、植株脱病毒和种质保存等方面,广泛应用组织培养技术.
（一）组织培养技求的应用
用于花药或花粉培养的供体植株,在生长条件下,从幼年的植株取出花药.由于花粉发育时期和花蕾的某些外部形态特征（如花冠筒长度和花冠露出花萼的时间等）之间的大致的相关性,因此可以利用这些外部标志,去选择大致处于所需要时期的花蕾.但在实验中必须由每个花蕾取出一个花药,通过镜检确定花粉发育的准确时期.
在水稻中,以单核靠边期的花粉对诱导单倍体植株较为适宜,在外部形态上可根据叶枕距为5~15cm,颖片淡黄绿色、雄蕊长度接近颖片长度的1/2这些条件鉴定.在取穗前先将旗叶鞘用70%酒精擦洗一遍.在超净工作台内剥去旗内鞘,取出稻穗,放入10%漂白粉溶液中消毒10min,换无菌水洗一次.在取花药之前用70%酒精将手擦洗两遍.取花药时左手持穗,右手用镊子从颖壳中取出花药,放在无菌培养皿中,待花药有一定数目时,用接种环将他们接种到培养基上.培养5天后,花药逐渐变为黑褐色,20天左右花药裂开,从中长出淡黄色的花粉愈伤组织,以后先形成芽,后长出根,形成幼苗.
烟草花药培养的最适取样期是花粉为单核期的花蕾,此时花蕾的花冠大约与萼片等长.芦笋花药培养的最适取样期也是单核期的花粉,花蕾长2~2.5mm,选取一级侧枝的花蕾较为合适,因为在一级侧枝的花蕾发育良好,数量大,发育同步.烟草花药消毒方法基本与水稻花药培养相同.
必须注意整个操作过程中不应使花药受到损伤,若受到损伤,则应淘汰,因为损伤常常会刺激花粉壁形成二倍体的愈伤组织.
花药培养的条件,一般是光照（12~18 h,5000~10000lx,28°C）和黑暗（12~16 h,22°C）周期交替进行.（P106 L.P107 L.4）