定量PCR用rRNA做内标请问定量PCR为什么要用rRNA做内标?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/17 01:26:48
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定量PCR用rRNA做内标
请问定量PCR为什么要用rRNA做内标?
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1.细胞RNA提取物中的最大含量就是rRNA,相对含量比较稳定,用来控制你的加样量.你平时测RNA浓度,实际上的数值就是rRNA的浓度.如果你跑胶,肉眼能看到的就是2条rRNA的条带.
2.注意点：一定要稀释!,切记.不然18s rRNA的扩增曲线在5个循环就饱和了,无法比较定量.一般如果不是在同一个管中测目标基因和内参的话,做内参的那个管子样本要稀释100倍.
3.其他house keeper基因也可以做内标,比如GAPDH,或者β-actin.都是一些表达恒定,水平较高的基因
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