为什么蛋白质结晶难?蛋白质结晶为什么耗时耗力?膜蛋白的纯化难点主要在哪里?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/02/01 07:21:24
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为什么蛋白质结晶难?
蛋白质结晶为什么耗时耗力?膜蛋白的纯化难点主要在哪里?
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纠正一下楼上的
1.晶体是高度规则的,{理论上}每个晶格里要是一样的东西,每个原子在相对同样的位置.蛋白质是大分子,有成千上万上的原子跑来跑去,所以要得到一个规则的晶体是很难的.你能找到的蛋白质晶体结构,基本上都只是用蛋白质的一小部分来结晶的,选的是最最稳定的部分.
我自己就是做蛋白质结晶的,真的很难.
2.膜蛋白难纯化是因为膜蛋白疏水,所以说不溶啊,还怎么纯化得出来.膜蛋白之所以疏水是因为它们是在膜上的,膜是疏水的磷脂双分子层,疏水的爱和疏水的在一起嘛.要想纯化膜蛋白必须要用一些detergent增加它们在水里的溶解性.
:)
1,蛋白质容易变性
2,膜成分复杂,脂质和蛋白质都是有机物,不好分离
蛋白质结晶的关键是稳定,需要对各种条件如ph,温度,沉淀剂等进行筛选,同时蛋白本身的稳定性更是关键。
膜蛋白由于在膜内,疏水性较高,普通方法无法提纯,需要引入lipid或者detergent,这样在筛选过程中,相当于引入了另一个维度的变量,较之可溶蛋白当然要困难很多...
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蛋白质结晶的关键是稳定,需要对各种条件如ph,温度,沉淀剂等进行筛选,同时蛋白本身的稳定性更是关键。
膜蛋白由于在膜内,疏水性较高,普通方法无法提纯,需要引入lipid或者detergent,这样在筛选过程中,相当于引入了另一个维度的变量,较之可溶蛋白当然要困难很多
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