DNA链接酶有连接单链DNA的本领吗?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 14:58:48
DNA链接酶有连接单链DNA的本领吗?
DNA链接酶有连接单链DNA的本领吗?
DNA链接酶有连接单链DNA的本领吗?
网上有两种答案,天涯和百度还有很多地方.各不相同.下面这个比较赞同,但是我还是查查文献问问老师搞清楚了再回答你吧.:)
请等等.
没有.
1、一般性质：大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链.对胰蛋白酶敏感,可被其水解.水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物,但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成.DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子,和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近,这也是比较合理的现象.因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合,填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口.这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用,连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组.
噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链,分子量为60KD,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制.此酶的催化过程需要ATP辅助.T4DNA连接酶可连接DNA-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端.另外,NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率,而对T4DNA连接酶则无效.无论是T4DNA连接酶,还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接.
2、作用机制：DNA连接酶利用NAD或ATP中的能量催化两个核酸链之间形成磷酸二酯键.反应过程可分三步：
(1)NAD 或ATP将其腺苷酰基转移到DNA连接酶的一个赖氨酸残基的ε—氨基上形成共价的酶-腺苷酸中间物,同时释放出烟酰胺单核苷酸(NMN)或焦磷酸.
(2)将酶-腺苷酸中间物上的腺苷酰基再转移到DNA的5'-磷酸基端,形成一个焦磷酰衍生物,即DNA-腺苷酸;
(3)这个被激活的5'-磷酰基端可以和DNA的3'-OH端反应合成磷酸二酯键,同时释放出AMP.
DNA连接酶所催化的整个过程是可逆的.酶-腺苷酸中间物可以与NMN或PPi反应生成NDA或ATP及游离酶;DNA-腺苷酸也可以和NMN及游离酶作用重新生成NAD.该逆反应过程可以在AMP存在的情况下使共价闭环超螺旋DNA被连接酶催化,产生有缺口的DNA-腺苷酸,生成松弛的闭环DNA.