植物基因组pcr什么都没有我现在做到转基因筛选这一步了,已经提完植物基因组DNA,也设计好了引物,可什么都没p出来,不知道什么原因,是我根本就没转进去吗?可从蛋白水平检测是有差异的,

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/20 01:21:16
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植物基因组pcr什么都没有
我现在做到转基因筛选这一步了,已经提完植物基因组DNA,也设计好了引物,可什么都没p出来,不知道什么原因,是我根本就没转进去吗?可从蛋白水平检测是有差异的,

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建议从以下几个方面思考:
1、PCR温度设置,多做一些梯度,不同温度会有结果差别
2、循环次数
3、实验过程中DNA是否收到相对剧烈的震荡
4、重新研究引物设计是否合理,如果有其他设想可尝试其他引物
我植物做的不多,不能很好的区别动植物基因的差别,希望我的回答对你有所帮助

实验总是需要重复的,需要一点耐心。引物的合成是关键,可以做对照试验检测一下,或者更换引物。另外PCR的反应时间,循环次数也有影响,应该做几个梯度试试。

是否p出来东西,有许多影响因素,比如引物特异性不好、模板陈旧、PCR成分没有加完整、酶失活等等,建议每一步都尽可能地设置对照,以便找出问题所在。

基因组dna的浓度不适合反应体系,多做几个浓度梯度,摸索一下最适的浓度,会批出来的

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