使用核酸染料GOLDEN VIEW,琼脂糖胶背景是白色的白色背景使得分辨率比较低,但是也能看到DNA条带,而且白色背景会随着电泳移动,露出一部分透明背景,交界处很平整是不是缓冲液温度过高的原因
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/24 20:10:57
使用核酸染料GOLDEN VIEW,琼脂糖胶背景是白色的白色背景使得分辨率比较低,但是也能看到DNA条带,而且白色背景会随着电泳移动,露出一部分透明背景,交界处很平整是不是缓冲液温度过高的原因
使用核酸染料GOLDEN VIEW,琼脂糖胶背景是白色的
白色背景使得分辨率比较低,但是也能看到DNA条带,而且白色背景会随着电泳移动,露出一部分透明背景,交界处很平整
是不是缓冲液温度过高的原因,或者因为胶太厚了
使用核酸染料GOLDEN VIEW,琼脂糖胶背景是白色的白色背景使得分辨率比较低,但是也能看到DNA条带,而且白色背景会随着电泳移动,露出一部分透明背景,交界处很平整是不是缓冲液温度过高的原因
所答非所问嘛.
我没做过,不过这和EB染色一样,EB在电泳的过程中就和核酸的运动方向相反.
是否可以考虑跑完电泳后将胶浸泡在GOLDEN VIEW中染我呢
问题: 凝胶电泳操作应注意哪些事项?
回复: 1. 琼脂糖:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移及荧光背景的强度,应有选择地使用。
2. 凝胶的制备:凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致,溶解的凝胶应及时倒入板中,避免倒入前凝固结块。倒入板中的凝胶应避免出现气泡,以免影响电泳结果。
3. 电泳缓冲液:为保持电泳所需的离子强度和pH,应常更新电泳...
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问题: 凝胶电泳操作应注意哪些事项?
回复: 1. 琼脂糖:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移及荧光背景的强度,应有选择地使用。
2. 凝胶的制备:凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致,溶解的凝胶应及时倒入板中,避免倒入前凝固结块。倒入板中的凝胶应避免出现气泡,以免影响电泳结果。
3. 电泳缓冲液:为保持电泳所需的离子强度和pH,应常更新电泳缓冲液。
4. 样品加入量:一般情况下,0.5cm宽的梳子可加0.5μg的DNA量,加样量的多少依据加样孔的大小及DNA中片段的数量和大小而定。当加样孔大时,样品上样量应相应加大,否则会造成条带浅甚至辩认不清;反之则应适当减少加样量,但是上样量过多会造成加样孔超载,从而导致拖尾和弥散,对于较大的DNA此现象更明显。
5. DNA样品中盐浓度会影响DNA的迁移率,平行对照样品应使用同样的缓冲条件以消除这种影响。DNA迁移率取决于琼脂糖凝胶的浓度,迁移分子的形状及大小。采用不同浓度的凝胶有可能分辨范围广泛的DNA分子,制备琼脂糖凝胶可根据DNA分子的范围来决定凝胶的浓度。小片段的DNA电泳应采用聚丙烯酰胺凝胶电泳以提高分辨率。
http://www.biokitchina.com/tech_FAQ5-3.html
好好学习吧
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