CHO细胞的DHFR系统是根据什么原理设计的呢?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/17 09:45:29
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CHO细胞的DHFR系统是根据什么原理设计的呢?
CHO细胞的DHFR系统是根据什么原理设计的呢?
这里的CHO细胞是指DHFR缺陷型的细胞,不含二氢叶酸还原酶基因,不能合成核酸,必须在含有HT的培养基里生长.
当转染的目的基因连有dhfr基因时,阳性细胞也就获得了dhfr基因.MTX是二氢叶酸还原酶的抑制剂,可阻碍其作用.当细胞培养基内含有MTX时,二氢叶酸还原酶被抑制,通过反馈调节.使得该基因自我扩增,连带其上下又100-1000kb的基因都会扩增.如此目的基因也得到扩增,即可提高目的蛋白的表达量.
DHFR是指二氢叶酸还原酶，CHO-DHFR细胞是二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型CHO细胞，在缺乏DHFR的情况下无法生长，可以转染表达DHFR的质粒进入该细胞系，这样，转染成功的细胞才能存活，其他细胞死亡，可以作为稳定细胞系构建的筛选系统CHO细胞的GS系统筛选和DHFR系统筛选可以结合起来吗？ 哪个系统筛选的速度更快？...
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DHFR是指二氢叶酸还原酶，CHO-DHFR细胞是二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型CHO细胞，在缺乏DHFR的情况下无法生长，可以转染表达DHFR的质粒进入该细胞系，这样，转染成功的细胞才能存活，其他细胞死亡，可以作为稳定细胞系构建的筛选系统
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