PCR循环次数是否越多越好?为什么
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/11 14:38:18
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PCR循环次数是否越多越好?为什么
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PCR循环次数是否越多越好?为什么
PCR循环次数通常就是30左右.循环数太多了,虽然可以一定程度的提高产物量,但是由于反应时间过长,有一些非特异产物的扩增也会相应增加,而且随着酶的扩增能力下降,合成目标片段的能力也会随之下降,也可能引起其他的非特异扩增.dNTP也会消耗,如果有某一种dNTP消耗比较大,后续扩增就难免会引起错配.所以如果产物已经足够用于后续分析,一般都不太会过度延长循环次数的.
不是的,随着反应的进行,酶会逐渐失活、dNTP等原料会逐渐消耗掉。因此在一定范围内,随着反应循环数的增加,产物会增多;但超过了就不好了。
一般设置30-35个循环就很够了
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