PCR循环参数是如何确定的?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 11:50:45
PCR循环参数是如何确定的?PCR循环参数是如何确定的?PCR循环参数是如何确定的?(本文节选自“中学生物教学”2007年第4期)在选择的变性温度下,DNA分子越长,两条链完全分开所需的时间也越长.如
PCR循环参数是如何确定的?
PCR循环参数是如何确定的?
PCR循环参数是如何确定的?
(本文节选自“中学生物教学”2007年第4期)
在选择的变性温度下,DNA分子越长,两条链完全分开所需的时间也越长.如果变性温度过低或时间太短,模板DNA中往往只有富含AT的区域被变性.在PCR的第一个循环中,有时常把变性时间设计为5
min,来增加大分子模板DNA彻底变性的概率,又称此为预变性.当模板DNA的G+C含量超过55%时,需要更高的变性温度,来源于古细菌的DNA聚合酶比TaqDNA聚合酶更能耐受高温,因此更适合用来扩增富含GC的DNA模板.
复性过程(即退火)采用的温度至关重要.如果复性温度太高,寡核苷酸引物不能与模板很好地复性,扩增效率将会非常低.如果复性温度太低,引物将产生非特异性复性,从而导致非特异性的DNA片段的扩增.
bp/min.根据多数研究者的经验,确定了一个规则,即:靶基因的每1 000 bp的扩增产物的延伸时间被设计为1
min,以此类推.对于PCR的最后一个循环,许多研究者常把延伸时间增加为以前循环的延伸时间的3倍以上,以使所有扩增产物完成延伸,这又称为后延伸.
(4)循环数目一般都为30,这个数值是怎么来的?PCR扩增所需的循环数目决定于反应体系中起始的模板拷贝数以及引物延伸和扩增的速率.一旦PCR反应进入几何级数增长期,反应会一直持续下去,直至某一成分成为限制因素.从这一点上来说,扩增产物中绝大多数应该是特异性的扩增产物,而非特异性的扩增产物低到难以检测的程度.
PCR循环参数是如何确定的?
如何确定pcr反应中最佳循环数我收到杂志的修改说明,让我说一下如何确定的rt-pcr反应循环数,我的是25个循环,我当时只是参考文献没有做梯度pcr确定,现在也不确定25个循环是否到了平台期,我
如何判断pcr扩增的循环次数
请问pcr产物测序后,如何确定从哪开始是我要的序列呢?
如何确定有利的循环倍率?
如何确定相对荧光定量pcr法的模板浓度
PCR反应体系中,各试剂加样量是如何确定的?
PCR热循环仪价格如何榨汁搅拌机PCR热循环仪微量移液器微量离心管水浴锅电泳仪请问以上的器材,价格如何?
do while 循环是如何循环的?
如何确定R2的阻值参数?如何确定R2的参数阻值,已确定出RC,RE,R1的阻值.
谁知道DEA效率的计算过程,还有参数是如何确定的?有输入输出变量,哪些参数是怎么确定的啊!
循环流化床锅炉对过量空气系数是如何确定的?
争循环流化床锅炉过量空气系数是如何确定的?
求解第5题积分上下限是怎么确定出来的?一个参数方程积分如何确定上下限?
如何确定循环水系统的补水量、排污量?
如何确定循环水系统的补水量、排污量?
知道弹簧刚度与弹力,如何确定弹簧的参数
如何通过齿轮参数确定轴的直径?